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上海細(xì)胞庫(kù)，人濾泡性甲狀腺癌細(xì)胞，F(xiàn)TC-133，細(xì)胞培養(yǎng)試劑*：
上海蒂科生物主營(yíng)業(yè)務(wù)：胎牛血清（HAKATA、HyClone、SERANA、NTC、Corning、BOVOGEN、PAA、PAN、SIGMA），無(wú)外泌體血清SBI，ELISA試劑盒，細(xì)胞（400多種類(lèi)通過(guò)STR鑒定），培養(yǎng)基（干粉、液體），雙抗，胰酶，CST,abcam,sigma等抗體。詳詢（同號(hào)）。
細(xì)胞培養(yǎng)是實(shí)驗(yàn)室里zui常見(jiàn)和zui基本的實(shí)驗(yàn)了，但卻不是zui簡(jiǎn)單的。別小看細(xì)胞培養(yǎng)，這里可蘊(yùn)含著大學(xué)問(wèn)。有時(shí)候細(xì)胞狀態(tài)不好，轉(zhuǎn)染、藥篩這些實(shí)驗(yàn)根本就沒(méi)辦法做。影響細(xì)胞培養(yǎng)的因素很多，讓我們先從培養(yǎng)基和血清說(shuō)起。
上海細(xì)胞庫(kù)，人濾泡性甲狀腺癌細(xì)胞，F(xiàn)TC-133，細(xì)胞培養(yǎng)試劑*：
經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種，HAKATA、HyClone、Sigma等。其中DMEM、RPMI-1640、MEM、DMEM/F12都是應(yīng)用zui廣泛的培養(yǎng)基。其他如M199、IMDM、L15培養(yǎng)基等也用于某些細(xì)胞的培養(yǎng)。
◆ MEM是由Eagle’s基礎(chǔ)培養(yǎng)基(BME)發(fā)展而來(lái)的，其中增加了組分的范圍及濃度。
◆ Dulbecco改良的BEM(DMEM)培養(yǎng)基是為小鼠成纖維細(xì)胞設(shè)計(jì)的，現(xiàn)在常用于貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。
DMEM的氨基酸濃度是MEM的兩倍，維生素濃度是MEM的4倍，采用雙倍的HCO3-和CO2濃度起到更好的緩沖作用。zui初的配方中葡萄糖含量為1000 mg/L，后來(lái)為了某些細(xì)胞的生長(zhǎng)需要，將葡萄糖含量又調(diào)整為4500 mg/L，這就是大家常說(shuō)的低糖和高糖了。
◆ aMEM含有附加的氨基酸、維生素以及核苷和脂肪酸，它可廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞類(lèi)型，包括對(duì)營(yíng)養(yǎng)成分要求苛刻的細(xì)胞。
◆ Ham’s F12是為在低血清濃度下克隆CHO細(xì)胞而設(shè)計(jì)的，現(xiàn)在也廣泛應(yīng)用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng)。F12還可以與DMEM等體積混合使用，得到一種高濃度與成分多樣化相結(jié)合的產(chǎn)物，這種培養(yǎng)基已應(yīng)用于許多原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細(xì)胞系的培養(yǎng)。
◆ RPMI-1640培養(yǎng)基是專(zhuān)為淋巴細(xì)胞培養(yǎng)而設(shè)計(jì)的，現(xiàn)在已廣泛應(yīng)用于懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)。
上海，細(xì)胞培養(yǎng)試劑*：
以前經(jīng)常聽(tīng)到有人問(wèn)，這種細(xì)胞該用哪一種培養(yǎng)基呢?其實(shí)這個(gè)問(wèn)題的答案可以很簡(jiǎn)單，也可以好復(fù)雜。此話怎講?如果這種細(xì)胞是購(gòu)自ATCC 或其他的細(xì)胞庫(kù)，那很簡(jiǎn)單，問(wèn)供應(yīng)商就行了。或者找到相關(guān)的文獻(xiàn)，作為參考。 Invitrogen上有一個(gè)Cell Line Database的工具，也很好用。選擇你感興趣的細(xì)胞類(lèi)型，它就會(huì)彈出推薦的培養(yǎng)基、血清和轉(zhuǎn)染試劑等，有時(shí)還有優(yōu)化好的轉(zhuǎn)染步驟，很方便。Sigma上也有一個(gè)Media Expert，包括了培養(yǎng)基所有成分的功能描述、使用推介和參考文獻(xiàn)等，它還是一個(gè)解決問(wèn)題能手，對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)中的常見(jiàn)問(wèn)題，如細(xì)胞貼壁不好、培養(yǎng)基變色等，它都會(huì)列出可能的原因，并提供補(bǔ)救辦法。這個(gè)Expert果然不簡(jiǎn)單! 但如果你是著手建立一種全新細(xì)胞的培養(yǎng)體系，根本找不到任何參考，那你就得花點(diǎn)時(shí)間自己試驗(yàn)了。萬(wàn)事開(kāi)頭難嘛。因?yàn)闆](méi)有一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)答案。在MEM中培養(yǎng)的細(xì)胞，很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長(zhǎng)。總之，shou選MEM做貼壁細(xì)胞培養(yǎng)、RPMI 1640做懸浮細(xì)胞培養(yǎng)會(huì)是一個(gè)好的開(kāi)始。你也可以購(gòu)買(mǎi)幾種培養(yǎng)基來(lái)，然后花大約兩周的時(shí)間做一個(gè)簡(jiǎn)單的細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)，來(lái)選擇其中zui適合的。有時(shí)候你會(huì)驚訝地發(fā)現(xiàn)你的zui佳培養(yǎng)條件與文獻(xiàn)報(bào)道的不同，就算是同一種培養(yǎng)條件，細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)也時(shí)好時(shí)壞，這是很正常的。因?yàn)樵噭⑺⒉煌?hào)的血清之間都存在著差異。要提高培養(yǎng)基的穩(wěn)定性，可以從培養(yǎng)基和血清兩方面入手。
上海，細(xì)胞培養(yǎng)試劑*：
以前大部分實(shí)驗(yàn)室都是用干粉培養(yǎng)基，但配制過(guò)程就較為繁瑣，要溶解、調(diào)pH值，過(guò)濾，過(guò)程中可能會(huì)產(chǎn)生一些濃度誤差，而且有些實(shí)驗(yàn)室的水質(zhì)并不理想，所以培養(yǎng)的效果會(huì)有差異。如果使用液體培養(yǎng)基，這種人為的誤差會(huì)減少，因?yàn)楫吘故谴笈抗I(yè)化生產(chǎn)的，批間差會(huì)很小。大家是不是感覺(jué)液體培養(yǎng)基會(huì)貴很多，以前是這樣，但現(xiàn)在非也。HyClone和Invitrogen都在國(guó)內(nèi)建立了液體培養(yǎng)基的生產(chǎn)基地，生產(chǎn)和運(yùn)輸成本大幅降低，所以現(xiàn)在的價(jià)格也只是50-60元/500ml，比干粉培養(yǎng)基貴不了多少，而且還幫你省了過(guò)濾器和時(shí)間。
血清含有生長(zhǎng)因子可促進(jìn)細(xì)胞的繁殖，含有附著因子可促進(jìn)細(xì)胞的貼壁，同時(shí)還具有抗胰酶活性。血清同時(shí)也是礦物質(zhì)、脂類(lèi)及激素的來(lái)源。zui常用的血清有小牛血清、新生牛血清、胎牛血清和馬血清等。牛血清是按照采血時(shí)間的早晚來(lái)分類(lèi)的。采血時(shí)間越早，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)越豐富，所含抗體也越少，因而胎牛血清適合要求高的細(xì)胞系和克隆化培養(yǎng)。由于瘋牛病的原因，到目前為止，我國(guó)政府仍然禁止從北美洲、歐洲和日本等地區(qū)進(jìn)口牛血清，因此市面上的牛血清大多來(lái)自澳洲、南美洲，或是國(guó)產(chǎn)的。 而血清批次間的差別就是不可避免的，這種差異來(lái)源于不同的制備方法和除菌方法、動(dòng)物的年齡差別及血清的儲(chǔ)存條件等，而且與取血?jiǎng)游锏膩?lái)源關(guān)系密切。不同的牧場(chǎng)、不同的氣候天氣及其他環(huán)境因素都可能影響血清的質(zhì)量。因此選好了一種血清就要盡可能長(zhǎng)期使用它。在需要更換時(shí)，也要盡量保持與原有的一批血清相似。
上海，細(xì)胞培養(yǎng)試劑*：
現(xiàn)在很多公司都提供血清預(yù)留，你一旦選定了某個(gè)批次的血清，zui好備足一年的量，這樣可以避免很多麻煩。血清固然是細(xì)胞培養(yǎng)中*的成分，但正如上文所說(shuō)，血清的批間差異大，更換血清時(shí)需要做大量的測(cè)試以取保替換的血清與原來(lái)的相似。而血清的供應(yīng)也是必須要考慮的因素。由于氣候或瘋牛病的影響，說(shuō)不定哪天血清就突然沒(méi)得賣(mài)了，那對(duì)實(shí)驗(yàn)的影響可非同小可。另外，血清的價(jià)格也很昂貴，雖說(shuō)現(xiàn)在也有便宜的國(guó)產(chǎn)血清，但是高品質(zhì)的澳洲血清價(jià)格仍舊高起。因此，也有一些實(shí)驗(yàn)室開(kāi)始換用無(wú)血清培養(yǎng)基。
上海，細(xì)胞培養(yǎng)試劑*：
常備現(xiàn)貨液體培養(yǎng)基：
Hylone 雙抗 | SV30010 | 100ml | HAKATA 雙抗 | 15140-122 | 100ml | ||||
Hylone 胰酶 | SH30042.01 | 100ml | HAKATA 胰酶 | 25200-056 | 100ml | ||||
DMEM低糖 | SH30021.01 | 500ml | HAKATA 胰酶 | 25200-072 | 500ml | ||||
DMEM高糖（不含丙酮酸鈉） | SH30022.01 | 500ml | HAKATA B-27™ 添加劑 | 17504-044 | 10ml | ||||
DMEM/F12 1:1 | SH30023.01 | 500ml | HAKATA B-27™ 添加劑 | 12587-010 | 10ml | ||||
MEM/EBSS | SH30024.01 | 500ml | RPMI1640培養(yǎng)基 | 31800-022 | 10*1L | ||||
HAM'S/F12 | SH30026.01 | 500ml | DMEM培養(yǎng)基(高糖）含丙酮酸鈉 | 12800017 | 10*1L | ||||
IMDM | SH30228.01 | 500ml | DMEM培養(yǎng)基(高糖) 不含丙酮酸鈉 | 12100046 | 10*1L | ||||
DMEM高糖（含丙酮酸鈉） | SH30243.01 | 500ml | DMEM高糖培養(yǎng)基 | C11995500BT | 500ml | ||||
M199/EBSS | SH30253.01 | 500ml | DMEM低糖培養(yǎng)基 | C11885500BT | 500ml | ||||
PBS緩沖液 | SH30256.01 | 500ml | PBS | C10010500BT | 500ml | ||||
α-MEM | SH30265.01 | 500ml | 1640培養(yǎng)基 | C11875500BT | 500ml | ||||
改良型RPMI-1640 | SH30809.01 | 500ml | DMEM/F12 | C11330500BT | 500ml | ||||
Mv-4-11 | 人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞 | MMQ | 大鼠垂體瘤細(xì)胞 | ||||||
RPMI 8226 | 人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞 | GH3 | 大鼠垂體瘤細(xì)胞 | ||||||
NALM-6 | 人急性B淋巴白血病細(xì)胞 | 大鼠LSECs | 大鼠肝竇內(nèi)皮細(xì)胞 | ||||||
Nthy-ori 3-1 | 人甲狀腺正常細(xì)胞 | MOLP-2 | 人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞 | ||||||
FHC | 人正常結(jié)直腸粘膜細(xì)胞 | BTT739 | 小鼠膀胱移行細(xì)胞癌 | ||||||
FLS | 大鼠成纖維樣滑膜細(xì)胞 | A875 | 人黑色素瘤細(xì)胞 | ||||||
HFL | 人成纖維樣滑膜細(xì)胞 | SNU-761 | 人肝癌傳代細(xì)胞 | ||||||
HLEB3 | 人晶狀體上皮細(xì)胞系 | HPaSteC（HPSC) | 人胰腺星狀細(xì)胞 | ||||||
HN13 | 人口腔鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞 | BMDC | 小鼠樹(shù)突狀細(xì)胞 | ||||||
RLE-6TN | 大鼠肺上皮Ⅱ型細(xì)胞 | McCoy | 小鼠成纖維細(xì)胞 | ||||||
PA-TU-8988S | 人胰腺癌細(xì)胞 | SU86.86 | 人胰腺導(dǎo)管癌細(xì)胞 | ||||||
HEEC | 人正常食管上皮細(xì)胞 | KYSE140 | 人食管鱗癌細(xì)胞 | ||||||
MES-SA | 人子宮肉瘤細(xì)胞 | WSU-DLCL2 | 人彌漫大B淋巴瘤細(xì)胞 | ||||||
MCFs | 小鼠心肌成纖維細(xì)胞 | NCI-H596 | 人肺鱗癌細(xì)胞 | ||||||
EHEB | 人慢性B細(xì)胞白血病細(xì)胞 | CCD-19Lu | 人肺成纖維細(xì)胞 | ||||||
SNK6 | 人NK/T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞 | HIMEC | 人腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞 | ||||||
PIG1 | 正常人皮膚黑色素細(xì)胞 | HDSMC | 人表皮血管平滑肌細(xì)胞 | ||||||
hTERT-RPE1 | 人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞 | EM-3 | 人髓系白血病細(xì)胞 | ||||||
ARPE-19/APRE-19 | 人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞 | KYSE50 | 低分化人食管鱗癌細(xì)胞 | ||||||
HO8910PM | 人卵巢癌細(xì)胞 | DSL-6A/C1 | 大鼠胰腺癌細(xì)胞 | ||||||
IPI-2I | 豬回腸上皮細(xì)胞 | PC14 | 人肺癌細(xì)胞 | ||||||
RT4-D6P2T | 大鼠神經(jīng)雪旺氏細(xì)胞 | Capan-1 | 人胰腺管癌細(xì)胞 | ||||||
HUVEC | 人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞 | TEV-1 | 人滋養(yǎng)層細(xì)胞 | ||||||
HTR8-SVneo | 人絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞 | MZ-CRC-1 | 人髓樣甲狀腺癌細(xì)胞 | ||||||
KG-1a | 人急性骨髓白血病細(xì)胞 | HS27 | 人皮膚成纖維細(xì)胞 | ||||||
OCI-AML3 | 人急性髓細(xì)胞性白血病細(xì)胞 | H2.35 | 小鼠肝細(xì)胞 | ||||||
bEnd.3 | 小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞 | KMBC | 人膽管癌細(xì)胞 | ||||||
C4-2 | 人前列腺癌細(xì)胞 | KHYG-1 | 人NK細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞 | ||||||
C4-2B | 人前列腺癌細(xì)胞 | Nutu19 | 大鼠卵巢癌細(xì)胞 | ||||||
DOK | 人口腔黏膜癌前病變細(xì)胞 | KU-19-19 | 人膀胱癌細(xì)胞 | ||||||
SCC-15 | 人舌磷癌細(xì)胞 | HUH-1 | 人肝癌細(xì)胞 | ||||||
DT40 | 雞淋巴瘤細(xì)胞 | NCI-H1373 | 人肺腺癌細(xì)胞 | ||||||
RBE4 | 大鼠腦血管內(nèi)皮細(xì)胞 | Colo357 | 人胰腺癌細(xì)胞 | ||||||
SCC-090 | 人口腔鱗癌細(xì)胞 | LSC-1 | 大鼠肝星形細(xì)胞 | ||||||
SCC-9 | 人舌鱗癌細(xì)胞 | CCC-HPF-1 | 人胚肺成纖維細(xì)胞 | ||||||
SCC-4 | 人舌鱗癌細(xì)胞 | HAPI | 大鼠小膠質(zhì)細(xì)胞 | ||||||
SCC-25 | 人舌鱗癌細(xì)胞 | NCI-H322[H322] | 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 | ||||||
THLE-2 | SV40轉(zhuǎn)化人肝上皮細(xì)胞 | HT115 | 人結(jié)腸癌細(xì)胞 | ||||||
THLE-3 | SV40轉(zhuǎn)化人肝上皮細(xì)胞 | CCD-841 CoTr | 人結(jié)腸癌細(xì)胞 | ||||||
CAL-51 | 人乳腺癌細(xì)胞 | CNLMG-B5537SKIN | 人成纖維細(xì)胞 | ||||||
CAL-148 | 人乳腺癌細(xì)胞 | TMK-1 | 人胃癌細(xì)胞 | ||||||
ZYM-DIEC02 | 豬小腸上皮細(xì)胞 | GTL16 | 人胃癌細(xì)胞 | ||||||
G422 | 小鼠腦神經(jīng)膠質(zhì)母細(xì)胞 | SW954 | 人外陰鱗癌細(xì)胞 | ||||||
BMSC/hBMSCs | 人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 | HHL-5 | 人胚胎肝細(xì)胞 | ||||||
VCaP | 人前列腺癌細(xì)胞 | NHLF | 人正常肺成纖維細(xì)胞 | ||||||
VX2 | 兔間變表皮鱗癌瘤株 | MOLP-8 | 人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞 | ||||||
CF-1 MEF | 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 | MCF-12F | 人乳腺上皮細(xì)胞 | ||||||
AR42J | 大鼠胰腺外分泌細(xì)胞 | NCI-H226 | 人肺鱗癌細(xì)胞 | ||||||
PMVEC | 大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞 | MCAEC | 小鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 | ||||||
GES-1 | 人胃粘膜細(xì)胞 | IAR20 | 大鼠肝細(xì)胞 | ||||||
Toledo | 人彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞 | NCI-H2087 | 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 | ||||||
9L | 大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞 | MDA-PCA-2B | 人前列腺癌細(xì)胞 | ||||||
MLE-12 | 小鼠肺上皮細(xì)胞 | OCM-1A | 人脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞 | ||||||
KBM5 | 人慢性髓白血病細(xì)胞 | SHP-77 | 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 | ||||||
VSC4.1 | 脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元瘤細(xì)胞系 | MBMEC | 小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞 | ||||||
HIC | 人小腸癌細(xì)胞系 | DMS114 | 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 | ||||||
LN-18 | 人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞 | RCC4 | 人腎癌細(xì)胞 | ||||||
Kupffer | 肝枯否細(xì)胞 | HOMEC | 人卵巢微血管內(nèi)皮細(xì)胞 | ||||||
SNU475 | 人肝癌細(xì)胞 | PZ-HPV-7 | 人前列腺上皮細(xì)胞 | ||||||
T98G | 人腦膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞 | HECCL-1 | 人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞 | ||||||
HMEC-1 | 人微血管內(nèi)皮細(xì)胞株 | Rca-B | 大鼠鱗癌細(xì)胞 | ||||||
NCTC1469 | 小鼠正常肝細(xì)胞 | NCI-H1703 | 人肺鱗癌細(xì)胞 | ||||||
HIEC | 正常人腸上皮細(xì)胞 | LAPC4 | 人前列腺癌細(xì)胞 | ||||||
HPDE6-C7(H6C7) | 人正常胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞 | hOMF | 正常人口腔粘膜成纖維細(xì)胞 | ||||||
RGC-5 | 小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞 | CSQT-2 | 人肝癌細(xì)胞 | ||||||
hRMECs | 人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞 | RMC | 大鼠腎系膜細(xì)胞 | ||||||
MN9D | 小鼠中腦多巴胺能神經(jīng)元細(xì)胞 | HEC-251 | 人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞 | ||||||
HCS-2/8 | 人軟骨肉瘤細(xì)胞 | JVM-3 | 人慢性髓白血病細(xì)胞 | ||||||
RTE | 大鼠氣管上皮細(xì)胞 | MM96L | 人黑色素瘤細(xì)胞 | ||||||
NCI-H1993 | 人肺腺癌細(xì)胞 | HHUA | 人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞 | ||||||
MONOMAC6 | 急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞 | SAS | 人舌鱗癌細(xì)胞 | ||||||
SU-DHL-10 | 人彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞 | HSAS1 | 人皮膚成纖維細(xì)胞 | ||||||
