1M山梨醇溶液/酵母電轉感受態細胞制備液
英文名:1M Sorbitol Solution
描述：
1M的山梨醇一般用于釀酒酵母或者裂殖酵母電轉感受態的制備。
酵母感受態細胞的制備：
1.活化菌種。-80℃保存的菌種在固體YPDA培養基（YPDA加20g Agar/L）上劃線，在30℃培養2-4天。
2.挑取酵母單菌落在固體YPDA培養基上劃3-5 mm的短線，在30 ℃培養2-4天。待酵母單菌落長至2 mm長時，接種。
3.把酵母細胞接種到50 ml液體YPDA培養基的三角瓶中繼續培養，待OD600到1.3-1.5范圍內。
4.將酵母菌置于冰上放置10 min后，收集細胞。1000 g，離心5 min, 去上清。
5.沉淀用30-50 ml的預冷的無菌水懸浮。1000 g，離心5 min，去上清。重復洗滌2次。
6.沉淀用5mL 冰上預冷的1M 山梨醇溶液重懸。1000 g，離心5 min，去上清。
7.沉淀用0.4 mL 的預冷的1M 山梨醇溶液重懸，按照40 uL 分裝。
酵母轉化：
1.在40uL 的酵母感受態細胞中，加入5uL（100ng）的質粒，混勻。
2.轉移到預冷的電轉槽中，電擊。
3.在電轉槽中加入500uL 預冷的1M 山梨醇溶液，輕柔混勻。
4.涂布于相應的篩選培養基上，28-30℃培養3-5天。
供應產品列表：
| DO Supplement -Ade |
| DO Supplement -Ade/-His |
| DO Supplement -Ade/-His/-Leu/-Lys |
| DO Supplement -Ade/-His/-Leu/-Trp/-Met |
| DO Supplement -Ade/-His/-Leu/-Trp/-Ura |
| DO Supplement -Ade/-His/-Leu/-Trp/-Ura/-Met |
| DO Supplement -Ade/-His/-Leu/-Ura |
| DO Supplement -Ade/-His/-Met |
| DO Supplement -Ade/-His/-Trp |
| DO Supplement -Ade/-His/-Ura/-Trp |
| DO Supplement -Ade/-Leu |
| DO Supplement -Ade/-Leu/-His |
| DO Supplement -Ade/-Leu/-Trp |
| DO Supplement -Ade/-Leu/-Ura |
| DO Supplement -Ade/-Trp |
| DO Supplement -Ade/-Ura |
| DO Supplement -Arg |
| DO Supplement -Arg/-His/-Leu/-Lys/-Ura |
| DO Supplement -Arg/-Leu/-Ura |
| DO Supplement -Cys/-Met |
| DO Supplement -Cys/-Met/-Ura |
| DO Supplement -Cys-His/-Leu/-Met/-Trp/-Ura |
| DO Supplement -Glu/-Ura |
| DO Supplement -His |
| DO Supplement -His/-Leu/-Lys |
| DO Supplement -His/-Leu/-Lys/-Met/-Ura |
| DO Supplement -His/-Leu/-Lys/-Ura |
| DO Supplement -His/-Leu/-Met/-Trp/-Ura |
| DO Supplement -His/-Leu/-Met/-Ura |
雙雜交系統的建立得力于對真核生物調控轉錄起始過程的認識。細胞起始基因轉錄需要有反式轉錄因子的參與。80年代的工作表明， 轉錄因子在結構上是組件式的（modular）， 即這些因子往往由兩個或兩個以上相互的結構域構成，其中有DNA結合結構域（DNA binding domain，簡稱為BD）和轉錄結構域（activation domain，簡稱為AD），它們是轉錄因子發揮功能所的。單獨的BD雖然能和啟動子結合，但是不能轉錄。而不同轉錄因子的BD和AD形成的雜合蛋白仍然具有正常的轉錄的功能。如酵母細胞的Gal4蛋白的BD與大腸桿菌的一個酸性結構域B42融合得到的雜合蛋白仍然可結合到Gal4結合位點并轉錄。
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1M山梨醇溶液/酵母電轉感受態細胞制備液
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