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細胞劃痕實驗
細胞劃痕實驗
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  • 所在地 上海市

更新時間:2023-08-28 19:56:38瀏覽次數:1673

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【簡單介紹】
細胞劃痕實驗是一種操作簡單,經濟實惠的研究細胞遷移/腫瘤侵襲的體外試驗方法。這種方法的原理是,當細胞長到融合成單層狀態時,在融合的單層細胞上人為制造一個空白區域,稱為“劃痕“。劃痕邊緣的細胞會逐漸進入空白區域使“劃痕“愈合。
【詳細說明】


細胞劃痕實驗是一種簡單易行的檢測細胞運動的方法,實驗成本低,可以用來檢測貼壁生長腫瘤細胞的侵襲轉移能力。

細胞劃痕實驗是一種操作簡單,經濟實惠的研究細胞遷移/腫瘤侵襲的體外試驗方法。這種方法的原理是,當細胞長到融合成單層狀態時,在融合的單層細胞上人為制造一個空白區域,稱為“劃痕"。劃痕邊緣的細胞會逐漸進入空白區域使“劃痕"愈合。

基本步驟:“劃痕"的制造,細胞遷移期間圖像的獲得以及后期數據的處理。

步驟

一.準備:
能滅菌的器械都要滅菌,直尺和marker筆在操作前紫外照射30min(超凈臺內)

二.流程:
1.先用marker筆在6孔板背后,用直尺比著,均勻得劃橫線,大約每隔0.5~1cm一道,橫穿過孔。每孔至少穿過5條線。
2.在空中加入約5X105個細胞,具體數量因細胞不同而不同,掌握為過12小時能鋪滿。
3.第二天用槍頭比著直尺,盡量垂至于背后的橫線劃痕,槍頭要垂直,不能傾斜。
4.用PBS洗細胞3次,去處劃下的細胞,加入無血清培養基。
5.放入37度5%CO2培養箱,培養。按0,6,12,24小時取樣,拍照。

特點:1,在程度上模擬了體內細胞遷移的過程。
     2, 非常適合研究細胞與胞外基質(ECM),細胞與細胞之間相互作用引起的細胞遷移。
     3,與包括活細胞成像在內的顯微鏡系統兼容,可用于分析細胞間的相互作用。
     4,研究細胞遷移的體外實驗中簡單的方法。
 
傳統方法:細胞融合后,用槍頭在細胞層表面制造劃痕
方法缺陷:人工制造的“劃痕"很難*性,重復性差。





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