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全腦缺血動物模型

1 兩動脈阻斷法(occlusion of bilaterial carotis communis artery)

(1)復制方法  SD大鼠，雌雄不拘，體重為250～300g。經腹腔注射水合氯醛(350～400mg/kg體重的劑量)或戊丨巴丨比丨妥丨鈉(50～60mg/kg體重的劑量)麻醉后，仰臥位固定，剃除頸部毛發，手術區域皮膚常規消毒。頸前正中切口，分離雙側頸總動脈(carotis communis artery, OCA)，夾閉雙側CCA，同時合并低血壓以減少腦血流量，造成急性腦缺血。由于嚙齒動物(沙土鼠除外)腦血液循環有較人類豐富的側支循環，僅結扎雙側CCA不足以明顯降低腦血流量(CBF)，因此結合降壓藥三丨甲噻吩、酚妥拉明或靜脈放血等方法使動脈血壓降低至50mmHg(6.7kPa)，使CBF降低至正常的5％～15％。放血方法：由頸靜脈插管至右心房，供放血并連續記錄EEG。采用抽血的方法放血，失血達80mmHg(10.7kPa)時結扎雙側頸動脈，再繼續抽血，使血壓降至6.7kPa。

(2)模型特點  此方法的優點是操作簡便，用一次性手術即可完成，阻斷可逆，可人為控制動物呼吸。采用這種方法復制的模型，能進行缺血再灌流損傷的研究，模擬了臨床上休克、心功能不全、腦血管嚴重狹窄或阻塞合并血液低灌流引起的腦循環障礙，造成不同程度的腦組織缺血損傷。因而，對于探討人類缺血性腦損傷的發病規律，評價抗腦缺血藥物的療效等有價值。缺點是：①模型不能在清醒動物上復制，無法研究血管狹窄后行為學的變化。②常因存在側支循環而造成缺血不，部位不宜確定。③腦缺血時限長，有時導致腦缺血后抽搐、癲癎等并發癥的發生。且由于低血壓狀態，可干擾其他器官、組織的供血和實驗結果。此方法除可用于大鼠外，也可用于兔、貓和猴的性腦缺血。

2 四動脈阻斷法(occlusion of four blood vessels)

(1)復制方法  SD大鼠，雌雄不拘，體重為250～300g。經腹腔注射水合氯醛(350～400mg/kg體重的劑量)或戊丨巴丨比丨妥丨鈉(50～60mg/kg體重的劑量)麻醉后，仰臥位固定，剃除頸部毛發，手術區域皮膚常規消毒。頸前正中切口，分離雙側頸CCA，套線備用。同時枕部切口(頸部前傾30°，利于手術部位的暴露)，借助手術顯微鏡分離暴露頸椎橫突翼并找左右橫突孔(椎動脈在入腦前從此孔下通過)，將灼熱的電烙鐵尖頭(直徑：0.5mm)直接插入翼突孔，深度以2～3mm為宜，電凝雙側椎動脈(vertebral artery, VA)造成永丨久性閉塞。插入時間不宜過長，1～2s即可，避免造成局部產熱過高而損傷脊髓和腦干。電烙鐵拔出時宜緩不宜急，以免將椎動脈燒斷部位拉破，引起動物大量出血導致死亡。也可采用鉆透頸椎小孔的方法，在直視下直接燒灼VA，成功率100％。24h后用乙丨醚淺麻醉大鼠(也可在清醒狀況下手術)，頸部常規消毒，打開頸前正中切口，將套在雙側頸總動脈下的備用線結扎(也可用微型無創動脈夾夾閉兩側 CCA)，根據實驗需要可阻斷血流10～60min。松開結扎線(或動脈夾)后可實行再灌注研究。

(2)模型特點  本模型是一個能夠導致嚴重大腦缺血，具有較強可復制性的誘發模型。優點是缺血，檢驗缺血是否成功的指標明確，且可進行缺血再灌注研究。缺點是手術復雜，成功率低，個體差異大，術后存活率為50％～80％。在手術過程中翼突孔的區分是阻斷VA的關鍵，在翼突孔前上方有一小切口，若肌肉分離不，易將該切口誤認為是翼突孔，若在此處燒灼，不但不能阻斷VA，而且易燒傷脊髓，甚至腦干，引起動物立即死亡。

3 全腦反復缺血再灌注(reperfusion after complete cerebral ischemia)

1.兩動脈阻斷后再灌注  按兩動脈阻斷法暴露雙側頸總動脈后，在雙側頸總動脈下用已穿好的備用線結扎或微型無創動脈夾阻斷雙側頸總動脈血流(10～60min)，之后松開結扎線(或動脈夾)實行再灌注，可進行反復缺血再灌注研究。

2.四動脈阻斷后再灌注  按四動脈阻斷法實施四動脈阻斷24h后，再次暴露雙側頸總動脈，用微動脈夾可逆性夾閉雙側頸總動脈5min，反復3次，每次間隔1h，隨后恢復供血，縫合創口。