目錄:上海一研生物科技有限公司>>生化檢測試劑盒>>氨基酸代謝系列>> 吡咯啉5羧酸合成酶(P5CS)生化檢測試劑盒
供貨周期 | 現貨 | 規格 | 100管/48樣 50管/24樣 |
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貨號 | EY-01S1114 | 應用領域 | 生物產業 |
主要用途 | 僅用于科研 |
產品名稱:吡咯啉5羧酸合成酶(P5CS)生化檢測試劑盒
規格:100管/48樣 50管/24樣
貨號 : EY-01S1114
測試方法:微量法 可見分光光度法
分類:氨基酸代謝系列
測定意義:
是植物體內適應逆境脅迫的一種重要的滲透調節物質。高等植物中代謝因其初始底物不同,分為( Glu) 和( Orn) 兩條合成途徑。吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS, Δ1-pyrroline-5-carboxylate synthetase)是以為前體合成途徑的關鍵酶,對植物適應逆境脅迫起關鍵作用。
測定原理:
吡咯啉-5-羧酸合成酶催化生成P5C過程中分解ATP生成ADP和無機磷,通過鉬酸銨比色法測定單位時間內產生無機磷的量可確定P5CS活性。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水
試劑一:液體×1瓶,室溫保存。
試劑二:液體×1瓶,4℃保存。
試劑三:粉劑×2瓶,-20℃保存。臨用前加入22mL試劑二,現配現用。
試劑四:液體×1支,4℃保存。
1、組織:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿。16000g,4℃離心20min,取上清置冰上待測。
2、細菌、真菌:按照細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);16000g, 4℃離心20min,取上清液置冰上待測。
3、血清等液體:直接測定。
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(1)按照蛋白濃度計算
活性單位定義:25℃中每毫克蛋白每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。
ADH (nmol/min/mg prot) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(Cpr×V樣)÷T
=1608×△÷Cpr
(2)按照樣本質量計算
活性單位定義:25℃中每克組織每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。
ADH (nmol/min/g鮮重) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(W×V樣÷V樣總)÷T
=1608×△A÷W
(3)按細胞數量計算
活性單位定義:25℃中每104個細胞每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。
ADH (nmol/min/104cell) =(△A÷ε÷d×V反總×109)÷(細胞數量×V樣÷V樣總)÷T
=1608×△A ÷細胞數量
(4)按液體體積計算