NR8383 大鼠肺泡巨噬細胞

細胞具體情況介紹：

細胞名稱                       NR8383 大鼠肺泡巨噬細胞

來源                               ATCC 細胞庫

種屬                              大鼠

組織                              肺

生長特性                       貼壁

成瘤情況                       未成瘤

建議使用培養基             

龍躍細胞庫簡介：

我公司自有高品質進口來源細胞庫， 所有細胞來源為進口母細胞， 經過永生化處理制成傳代細胞株， 保證為國內高品質傳代細胞株。

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 細胞處理方法

以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考，具體操作還需要根據到貨時細胞密度，細胞生長狀態等具體情況，酌情處理，如需要更詳細技術指導，請及時電話或郵件聯系。

一．貼壁細胞

1. 客戶接收到細胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養瓶外部。
2. 肉眼觀察細胞培養基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張）。
3. 顯微鏡觀察細胞，當細胞融匯80%左右（可以傳代的情況下），細胞應該在37度培養箱預溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度，培養瓶應預留一部分培養基繼續培養。
4. 嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶。
5. 將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養基培養細胞）。
6. 用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
7. 1000rpm,5min離心，重懸細胞。換新的細胞培養瓶，37℃,5%CO₂  培養。

二．懸浮細胞

1. 接收到細胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養瓶外部。

2. 肉眼觀察細胞培養基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張）。

3. 嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶。

4. 將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒）。

5. 1000rpm,5min離心，重懸細胞。 換新的細胞培養瓶和新鮮培養基，37℃,5%CO₂  培養

維修 PCR/酶標儀/所有實驗室儀器

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細胞培養小課堂 

注意事項

（1）*次開始培養某種細胞時，一定要用該細胞的名稱進行檢索，可以得到關于該細胞的詳細信息，包括需要使用的培養基、血清、添加劑、通常的消化時間、傳代時間等。對于特定的細胞（如原代培養的細胞），需要查閱相關文獻來獲得更準確的培養方法。

（2）進入細胞間開始細胞培養時，必須嚴格按照下列步驟操作：

①確定所有的細胞操作用的溶液和耗材都已經消毒并檢測沒有問題，不確定的溶液和耗材請勿使用，除非特殊情況，不要借用別人的溶液。

②確定衣服的袖口已經卷起或者白大褂的袖口已經扎緊。

③確定酒精燈內的酒精量，需要的話及時進行補充。

④確定所有需要用到的溶液和耗材都放在伸手可及的位置。為了方便單手開啟瓶蓋，實驗開始前可以把所有瓶蓋旋松。

⑤盡量不要直接傾倒溶液，除非瓶口沒有被燒壞。如果傾倒失敗，溶液粘在瓶口，請用噴過75%酒精的紙巾仔細清潔瓶口周圍（不要接觸到瓶口）后在火焰上簡單燒灼。

⑥操作時如果不能肯定所用的耗材是潔凈的，必須及時更換。

⑦實驗完畢及時收拾，保持工作區域清潔整齊，后用75%酒精清潔臺面。

（3）細胞污染的預防

①實驗用品防止污染。細胞培養所用試劑、耗材、器材的清洗、消毒要*，各種溶液滅菌要仔細，并在無菌實驗檢測陰性后才能使用。操作室及剩余的無菌器材要定期清潔、消毒、滅菌。

②操作過程防止污染。

③穿著容易起靜電或吸附灰塵的衣物必須更換為白大褂后才能進入細胞間。

④實驗開始前需要確定戴的手套沒有問題，只要接觸過生物安全柜之外的物品，必須及時對手套進行消毒。

⑤進入細胞培養間后關好門，坐下來盡量少走動以免影響生物安全柜的風簾。工作開始前要先用75%酒精棉球擦手和瓶蓋。事先要嚴格檢查所用的器材、溶液和細胞，不要把污染品或未經消毒的物品帶入無菌室內，更不能隨便使用，以免造成大規模污染。

⑥細胞操作時動作要輕，必須在火焰周圍無菌區內打開瓶口，并將瓶口放在火焰周圍簡單轉動燒灼，注意不要讓火焰把塑料瓶口燒化。

⑦實驗操作時生物安全柜的隔板要盡可能放低，盡量減少談話，打噴嚏或咳嗽時不能對著工作區，以免造成不必要的污染。

⑧瓶蓋應當倒放在遠離自己的地方，以避免瓶蓋被誤操作所污染。

⑨不要從敞開的容器口上方經過，以避免衣服上掉落不明物體對細胞的污染。

⑩實驗操作時要注意及時更換巴斯德吸管、移液槍槍頭和移液管，切勿一根管子做到底。一旦發現接觸了非潔凈或者無法確定潔凈的物品必須直接丟棄。實驗完畢應及時收拾，保持實驗室清潔整齊，后用75%酒精清潔臺面。