重組羧肽酶B（RCPB）
◆概述
羧肽酶B（E.C 3.4.17.2）屬金屬羧肽酶A和羧肽酶B（CPA/CPB）家族，可選擇性水解蛋白或多肽羧基端的Arg和Lys。不同于切割芳香族或脂肪類氨基酸殘基的羧肽酶A，羧肽酶B優(yōu)先切割堿性氨基酸※，同時(shí)也能切割一些非堿性氨基酸。重組CPB的活性受到典型的金屬螯合劑如EDTA，及Cu2+，Hg2+抑制；而Zn2+，Mn2+等金屬離子則能夠不同程度提高酶活。

重組羧肽酶B（RCPB）

 

 

 

 

◆概述

 

羧肽酶B（E.C 3.4.17.2）屬金屬羧肽酶A和羧肽酶B（CPA/CPB）家族，可選擇性水解蛋白或多肽羧基端的Arg和Lys。不同于切割芳香族或脂肪類氨基酸殘基的羧肽酶A，羧肽酶B優(yōu)先切割堿性氨基酸^※，同時(shí)也能切割一些非堿性氨基酸。重組CPB的活性受到典型的金屬螯合劑如EDTA，及Cu²⁺，Hg²⁺抑制；而Zn²⁺，Mn²⁺等金屬離子則能夠不同程度提高酶活。CPB的適pH為8.0，偏酸或偏堿均會(huì)造成活性下降，pH接近5.0時(shí)活性接近零，pH>12.0時(shí)活性*喪失。CPB在一定溫度內(nèi)（<60 ℃）活性隨溫度升高而上升。

 

※堿性氨基酸：水解生成的氫氧根負(fù)離子多于氫正離子的氨基酸，其特點(diǎn)是側(cè)鏈常含有可質(zhì)子化的堿性化學(xué)基團(tuán)。包括以下三種：

 

中文名	英文名	縮寫	符號(hào)	等電點(diǎn)
精氨酸	Arginine	Arg	R	10.76
賴氨酸	Lysine	Lys	K	9.74
組氨酸	Histidine	His	H	7.59

 

 

◆優(yōu)勢(shì)

 

 

●　單批次產(chǎn)量大，批間差小

●　高純度，高比活性

●　無(wú)外源性病毒污染，無(wú)動(dòng)物源生產(chǎn)原料

 

 

◆應(yīng)用范圍

 

生產(chǎn)工藝：重組胰島素及其類似物的生產(chǎn)制備工藝，重組多肽類藥物的生產(chǎn)制備工藝等。

質(zhì)控與科研：單克隆抗體的質(zhì)量檢測(cè)，蛋白質(zhì)C-末端氨基酸測(cè)定等。

 

 

◆純度

 

SDS-PAGE顯示純度＞90%。

 

 

◆使用方法

 

保存：25 mmol/L Tris-HCl， pH 7.6或無(wú)菌水；溶解后分裝-15 ℃以下保存。

酶切體系：pH 7.5~9.0；

推薦使用量：蛋白酶：融合蛋白質(zhì)量比1：50~1：1000

 

 

◆保存條件

 

儲(chǔ)存穩(wěn)定性：凍干粉存于-15 ℃以下，24個(gè)月穩(wěn)定；25 mmol/L Tris-HCl，pH 7.6溶解后分裝儲(chǔ)存于-15 ℃以下，

儲(chǔ)存穩(wěn)定性：反復(fù)凍融5次，活性無(wú)損失；溶解后2~8 ℃保存建議不超過(guò)3 d。

運(yùn)輸穩(wěn)定性：冰袋保溫運(yùn)輸，活性穩(wěn)定。

 

 

◆應(yīng)用實(shí)例

 

RCPB特異性酶切合成短肽

合成多肽序列YGKRLWK,理論酶切位點(diǎn)酶切產(chǎn)物YGKRLW及K，蛋白酶：合成多肽質(zhì)量比1：5000，37 ℃酶切反應(yīng)10 min，LC-MS驗(yàn)證酶切反應(yīng)特異性。

 

 

Peak#	R.T.	M.W.	Sequence
Peak 1	7.06 min	950.15	YGKRLWK
Peak 2	8.27 min	821.98	YGKRLW

 

 

 

◆產(chǎn)品信息

 

產(chǎn)品編號(hào)	產(chǎn)品名稱	規(guī)格	比活
RCPB0302	RCPB	10 mg	150 U/mg
RCPB0304	RCPB	10 μg	150 U/mg

 

 

◆相關(guān)產(chǎn)品

 

產(chǎn)品編號(hào)	產(chǎn)品名稱	規(guī)格	儲(chǔ)存條件	其他信息
MDRK0301	重組羧肽酶B檢測(cè)試劑盒	96 孔	2～8 ℃	檢測(cè)范圍： 15.6～1000 ng/mL