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solarbio PR1900 預(yù)染超低分子量蛋白MARKER 索萊寶原裝 現(xiàn)貨供應(yīng)
規(guī)格:20T
保存:-20℃
預(yù)染超低分子量蛋白質(zhì)Marker 北京索萊寶原裝現(xiàn)貨供應(yīng)
貨號:PR1900
規(guī)格:20T (200 ?1)
保存 :-20℃保存,有效期為一年。避免反復(fù)凍融,建議分裝凍存。
產(chǎn)品簡介:
預(yù)染超低分子量蛋白質(zhì)Marker為蛋白質(zhì)和多肽混合物的凍干粉,每種預(yù)染蛋白含量約為40?g,配有一支1×上樣緩沖液。
使用說明:
1.開封后,溶于200 ?1 1×上樣緩沖液,可根據(jù)需要進(jìn)行小量分裝,每管10?l,-20℃貯存,每次取一管使用,避免反復(fù)凍融。
2.使用前取分裝后的小管室溫融化后即可上樣電泳。
電泳示意圖:
凝膠的配置方法:
分離膠 夾層膠 濃縮膠
20%/4.5ml 16.5%/4.5ml 15.5%/4.5ml 10%/2ml 4%/2ml
49.5%T3%C / / / 0.407ml 0.160ml
49.5%T6%C 1.82ml 1.50ml 1.395ml / /
凝膠緩沖液 1.50ml 1.50ml 1.50ml 0.667ml 0.496ml
甘油 0.48ml 0.48ml 0.48ml / /
ddH2O 0.70ml 1.02ml 1.125ml 0.926ml 1.344ml
10%APS 40?l 40?l 40?l 20?| 20?|
TEMED 5?l 5?l 5?l 3?l 3?l
凝膠制備及染色注意事項:
1.先配制分離膠,聚合后再配制夾層膠,后配制濃縮膠,3種膠的制膠體積比為4:1.5:1。電泳時,30v跑1-2小時后,待指示前沿到達(dá)分離膠上沿時,把電壓調(diào)100v,電泳結(jié)束,整個電泳過程大約需要6-8小時。
2.電泳之后可將膠置于固定液中固定 20 分鐘,再進(jìn)行染色,能得到較好的蛋白條帶;如時間不允許,也可不進(jìn)行固定直接染色。如果使用配方 7 進(jìn)行染色時效果不好或考慮其毒性,請選擇本公司的考馬斯亮藍(lán)蛋白膠快速染色液(貨號:P1300),該產(chǎn)品具有染色快,無毒,靈敏性高等特點,是常規(guī)染色液的替代品。
3.由于多肽所含的氨基酸數(shù)目較少,因此如該多肽含有過多的極性氨基酸(堿性或酸性),則會影響其在
SDS-PAGE 圖上的條帶遷移率,即其表觀分子量可能和多肽的氨基酸理論推算分子量有一定距離。
4.由于 SDS-PAGE 的圖譜上,蛋白質(zhì)對數(shù)分子量和遷移率成正比直線關(guān)系的分子量范圍為 15,000-200,000,因此對于分子量小于 10000 的蛋白質(zhì)或多肽的分子量,只能根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)分子量進(jìn)行估計,推斷其是否落入預(yù)測的分子量范圍。
5.由于超低分子量多肽(3000及3000以下),極易從凝膠上浸出,因此染色及脫色時間不宜太長,脫色后凝膠也不宜在水中浸泡保存過久,否則條帶會消失。
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