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供貨周期 | 現貨 | 規格 | 2ml |
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貨號 | R8290 | 主要用途 | 瓊脂糖凝膠親和層析介質 |
瓊脂糖凝膠親和層析介質 rProtein A
核酸電泳是進行核酸研究的重要手段,是核酸探針、核酸擴增和序列分析等技術所*的組成部分。核酸電泳通常在瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠中進行,濃度不同的瓊脂糖和聚丙烯酰胺可形成分子篩網孔大小不同的凝膠,可用于分離不同分子量的核酸片段。以下中間介紹的是瓊脂糖核酸電泳操作步驟。
瓊脂糖凝膠親和層析介質 rProtein A
瓊脂糖核酸電泳操作步驟
1.用蒸餾水將制膠模具和梳子沖洗干凈,放在制膠平板上,封閉模具邊緣,架好梳子;
2.根據欲分離DNA片段大小用凝膠緩沖液配制適宜濃度的瓊脂糖凝膠:準確稱量瓊脂糖干粉,加入到配膠用的三角燒瓶內,定量加入電泳緩沖液(一般20~30?ml);
3.放入到微波爐內加熱熔化。冷卻片刻,加入一滴熒光染料,輕輕旋轉以充分混勻凝膠溶液,倒入電泳槽中,待其凝固;
4.室溫下30~45分鐘后凝膠*凝結,小心拔出梳子,將凝膠安放在電泳槽內;
5.向電泳槽中倒入電泳緩沖液,其量以沒過膠面1mm為宜,如樣品孔內有氣泡,應設法除去;
6.在DNA樣品中加入10×體積的載樣緩沖液(loading?buffer),混勻后,用槍將樣品混合液緩慢加入被浸沒的凝膠加樣孔內;
7.接通電源,紅色為正極,黑色為負極,切記DNA樣品由負極往正極泳動(靠近加樣孔的一端為負)。一般60~100V電壓,電泳20~40min即可;
8.根據指示劑泳動的位置,判斷是否終止電泳;
9.電泳完畢,關上電源,在凝膠成像儀上觀察電泳帶及其位置,并與核酸分子量標準Marker比較被擴增產物的大小。
瓊脂糖凝膠分離DNA片度大小范圍較廣,瓊脂糖核酸電泳操作步驟中要注意的是,不同濃度瓊脂糖凝膠可分離長度從200bp近50kb的DNA片段。瓊脂糖通常用水平裝置在強度和方向恒定的電場下電泳。