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產(chǎn)品名稱：TAKARA 載體克隆試劑盒 pMD 19-T 載體

產(chǎn)品貨號(hào)：6013

產(chǎn)品品牌：takara寶日醫(yī)

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產(chǎn)品信息：

· 品牌: Takara

· 貨號(hào): 6013

· 規(guī)格: 20 反應(yīng)

pMD 19-T Vector是一種高效克隆PCR產(chǎn)物 (TA Cloning) 的專用載體。本載體由pUC19載體改建而成，在pUC19載體的多克隆位點(diǎn)處的Xba I 和Sal I 識(shí)別位點(diǎn)之間插入了EcoR V 識(shí)別位點(diǎn)，用EcoR V 進(jìn)行酶切反應(yīng)后，再在兩側(cè)的3′端添加 “T" 而成。因大部分耐熱性DNA聚合酶進(jìn)行PCR反應(yīng)時(shí)都有在PCR 產(chǎn)物的3′末端添加一個(gè) “A" 的特性，所以使用本制品可以大大提高PCR產(chǎn)物的連接、克隆效率。
由于本載體以pUC19載體為基礎(chǔ)構(gòu)建而成，所以它具有同pUC19載體相同的功能。此外，本制品中的高效連接液Solution I 可以在短時(shí)間內(nèi) (約30分鐘) 完成連接反應(yīng)，其連接液可以直接用于細(xì)菌轉(zhuǎn)化，大大方便了實(shí)驗(yàn)操作。本制品中的Control Insert (500 bp) 還可以用于Control反應(yīng)。
本載體與pMD 18-T Vector 相比，本制品的β-半乳糖苷酶的表達(dá)活性更高，菌落顯示藍(lán)色的時(shí)間縮短，菌落顯示的藍(lán)色更深。因此，克隆后更容易進(jìn)行克隆體的藍(lán)白篩選。

產(chǎn)品名稱：克隆用T載體pMD™19-T Vector Cloning Kit

產(chǎn)品貨號(hào)：6013

產(chǎn)品品牌：takara寶日醫(yī)

買(mǎi)試劑，找華雅，更多生物試劑，就在華雅思創(chuàng)

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1. Solution I 請(qǐng)于冰中融解。
2. 克隆時(shí)使用的Insert DNA片段 (PCR產(chǎn)物) 建議進(jìn)行切膠回收純化，否則PCR產(chǎn)物中的短片段DNA (甚至是電泳也無(wú)法確認(rèn)的非特異性小片段)、殘存引物等雜質(zhì)都會(huì)影響TA克隆效率。
3. 按照本實(shí)驗(yàn)操作進(jìn)行連接后，直接進(jìn)行轉(zhuǎn)化時(shí)的連接液不要超過(guò)20 μl。當(dāng)要轉(zhuǎn)化的DNA量較大或準(zhǔn)備進(jìn)行電轉(zhuǎn)化時(shí)，需對(duì)連接液進(jìn)行乙醇沉淀，純化DNA后再進(jìn)行轉(zhuǎn)化。進(jìn)行乙醇沉淀時(shí)使用Dr. GenTLE Precipitation Carrier (Code No.: 9094) 可以提高DNA的回收率。
4. 連接反應(yīng)請(qǐng)?jiān)?5℃以下進(jìn)行，溫度升高 (>26℃) 較難形成環(huán)狀DNA。連接效率偏低時(shí)，可適當(dāng)延長(zhǎng)連接反應(yīng)時(shí)間至數(shù)小時(shí)。
5. 本制品來(lái)源于pUC19載體，因此，適合pUC19載體的感受態(tài)細(xì)胞都可以使用，如：JM109等。

pMD 19-T Vector的結(jié)構(gòu)

1. Solution I 請(qǐng)于冰中融解。
2. 克隆時(shí)使用的Insert DNA片段 (PCR產(chǎn)物) 建議進(jìn)行切膠回收純化，否則PCR產(chǎn)物中的短片段DNA (甚至是電泳也無(wú)法確認(rèn)的非特異性小片段)、殘存引物等雜質(zhì)都會(huì)影響TA克隆效率。
3. 按照本實(shí)驗(yàn)操作進(jìn)行連接后，直接進(jìn)行轉(zhuǎn)化時(shí)的連接液不要超過(guò)20 μl。當(dāng)要轉(zhuǎn)化的DNA量較大或準(zhǔn)備進(jìn)行電轉(zhuǎn)化時(shí)，需對(duì)連接液進(jìn)行乙醇沉淀，純化DNA后再進(jìn)行轉(zhuǎn)化。進(jìn)行乙醇沉淀時(shí)使用Dr. GenTLE Precipitation Carrier (Code No.: 9094) 可以提高DNA的回收率。
4. 連接反應(yīng)請(qǐng)?jiān)?5℃以下進(jìn)行，溫度升高 (>26℃) 較難形成環(huán)狀DNA。連接效率偏低時(shí)，可適當(dāng)延長(zhǎng)連接反應(yīng)時(shí)間至數(shù)小時(shí)。

5. 本制品來(lái)源于pUC19載體，因此，適合pUC19載體的感受態(tài)細(xì)胞都可以使用，如：JM109等。

產(chǎn)品名稱：TAKARA 載體克隆試劑盒 pMD 19-T 載體

產(chǎn)品貨號(hào)：6013

產(chǎn)品品牌：takara寶日醫(yī)

買(mǎi)試劑，找華雅，更多生物試劑，就在華雅思創(chuàng)

 載體克隆試劑盒, pMD 19-T 載體, TAKARA 克隆試劑盒, PCR產(chǎn)物克隆, 分子克隆Vector Cloning Kit, pMD 19-T Vector, TAKARA Cloning Kit, PCR Product Cloning, Molecular Cloning