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RT-PCR實驗代測,RT-PCR技術服務
上海信帆生物提供Q-PCR,RT-PCR,miRNA,mRNA實驗服務!
簡介:RT-PCR(實時熒光定量PCR)實驗服務
提供商:上海信帆生物科技有限公司
服務名稱:RT-PCR(實時熒光定量PCR)實驗服務
RT-PCR簡介:
RT-PCR稱為反轉錄PCR,實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
實時熒光定量PCR檢測服務,PCR實驗代測,RT-PCR代測實驗流程:
1.實驗用品準備;
2.樣本總RNA提取;
3.RNA濃度檢測;
4.反轉錄;
5.數據分析及結論。
客戶方提供:
細胞、組織、血液或cDNA樣本。
提供結果:
圖片,分析結果及實驗報告。
RT-PCR實驗代測,RT-PCR技術服務
很多同學能將 RT-PCR、Realtime-PCR、QPCR區分開?信帆生物帶你區分區分,撥開那扇PCR 迷霧:
其實 Rea-ltime-PCR和 qPCR(Quantitative Rea-ltime-PCR )是一碼事,都是實時定量PCR,指的是PCR過程中每個循環都有數據的實時記錄,因此可以對起始模板數量進行精確的分析。
雖然Real-time PCR(實時熒光定量PCR)和 Reverse transcription PCR(反轉錄PCR)看起來都可以縮寫為RT-PCR,但是,上的約定俗成的是:RT-PCR特指反轉錄PCR,而Real-time PCR一般縮寫為 qPCR(quantitative real-time PCR)
real-time RT-PCR中間的“RT”是 reverse transcription(逆轉錄),整個意思就是利用 mRNA 或 總RNA 為模板的實時逆轉錄PCR技術(quantitative Real-time RT-PCR)。real time RT-PCR指的是 qPCR+RT-PCR的組合,是說將mRNA逆轉錄為cDNA后再作為模板進行實時熒光PCR分析,因為RT-PCR是可以定性的,但不能進行定量檢測的。
所以不難理解 real-time RT-PCR(RT-qPCR) 就是結合了熒光定量技術的反轉錄PCR:先從 RNA 反轉錄得到 cDNA(RT),然后再用 Real-time PCR進行定量分析(qPCR)。
所以,實時熒光定量PCR,它不僅可以用cDNA作為模板,也可以用基因組DNA等作為模板。
QPCR至少有以下特點:
所用儀器少,只用一臺儀器。
檢測時間短,只須45分鐘~1小時10分鐘(試劑各異),而定性PCR須3~4小時,酶免終點定量須6~8小時,熒光終點定量須2~3小時。
操作極其簡單:前處理后,樣本插入儀器一小時后到電腦上來出報告即可,無須開蓋,移樣本(以前方法),避免污染。
結果精確:定性PCR只能定性,很粗略,終點定量PCR由于只能在40個熱循環結束后檢測熒光,被測熒光達到飽和導致定量不夠精確,屬于半定量狀態。而實時熒光QPCR是在擴增的每時每刻連續檢測各樣本的熒光值的變化。
檢測動態范圍:10~10000000000 DNA copies/ml
檢測精度:0.1RLU
辨別率:5000和10,000個模板拷貝樣本的辨別率99.7%。
尊敬的客戶:
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上海信帆生物實驗室代測服務:放免代測,WB實驗代測,免疫組化代測,熒光定量PCR代測,病理細胞染色代測,生化實驗代測等。
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