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產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 應用領域 | 醫療衛生,生物產業 |
|---|
產品介紹
Hieff® Bst Plus DNA Polymerase來源于Thermophilic Geobacillus sp DNA Polymerase I，經基因工程改造去除了其5’-3’核酸外切酶活性。本產品具有強5’-3’ DNA聚合酶活性、鏈置換活性及dUTP耐受性，更適合于防污染的等溫擴增反應，如LAMP、CPA等。
產品組分
編號 | 組分名稱 | 產品編號/規格 | |
14402ES92 (8,000 U) | 14402ES97 (40,000 U) | ||
14402-A | Hieff® Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL) | 200 μL | 1 mL |
14402-B | 10× Hieff® Bst Plus DNA Polymerase Buffer | 1 mL | 3 × 1 mL |
14402-C | 100 mM MgSO4 | 1 mL | 3 × 1 mL |
產品應用
本產品適用于LAMP、CPA、RCA等多種等溫擴增反應。
單位定義
1 U指65℃條件下反應30 min，能使10 nmol的dNTP摻入酸不溶性沉淀物所需的酶量。
酶保存液成分
10 mM Tris-HCl，50 mM KCl，0.1 mM EDTA，1 mM DTT，0.1% Triton X-100，50%甘油，pH 7.5 @ 25℃。
熱失活
85℃，5 min。
運輸與保存方法
冰袋運輸。-20℃保存，有效期2年。
注意事項
1. 酶使用時宜存放在冰盒內或冰浴上，使用完畢后宜立即放置于-20℃保存；
2. 本產品僅做科研用途；
3. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
LAMP實驗案例
1、反應體系配制
組分 | 體積 (μL) | 終濃度 |
10×Reaction Buffer | 2.5 | 1× |
100 mM MgSO4 | 0.75 | 3 mM+2 mM in buffer=5 mM |
dNTP Mix (25 mM each) | 1.4 | 1.4 mM each |
dUTP (25 mM) 選加 | 1.4 | 1.4 mM |
UDGase (1 U/μL) 選加 | 1 | 0.04 U |
模板DNA | 10 ng~1 μg | - |
10×Primers | 2.5 | - |
Hieff® Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL) | 1* | 1.6 U/μL |
ddH2O | to 25 | - |
【注】：1. *：根據不同實驗，Hieff® Bst Plus DNA Polymerase添加量可進行調整優化；
2. 10×Reaction Buffer：200 mM Tris-HCl，500 mM KCl，100 mM (NH4)2S04，20 mM MgS04，1% Tween-20，pH 8.8 @ 25℃。
3. 根據不同的實驗，Mg2+濃度可在4–10 mM之間調整。
4. 10× Primers：16 µM FIP/BIP，2 µM F3/B3，4 µM Loop F/B each。
5. 本公司dNTP（Cat#10124），dUTP（Cat#10128）和UDGase（Cat#10303）可以與本品配套使用。
2、反應條件
溫度 | 時間 | 作用 |
25~37°C | 5~10 min | 降解含U模板（選做） |
65°C | 30~60 min | 反應 |
85℃ | 5 min | 失活 |
