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產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 貨號 | 97055ES48 |
|---|---|---|---|
| 應用領域 | 醫療衛生,生物產業,制藥 |
產品介紹
產品簡介
腦源性神經營養因子（brain-derived neurotrophic factor，BDNF）是1982年Barde等首先在豬腦中發現的一種具有神經營養作用的蛋白質，屬于NGF家族神經營養因子的成員，是中樞神經系統和周圍神經系統中特定神經元亞群分化和存活所必需的。神經營養蛋白家族由至少四種蛋白質組成，包括NGF，BDNF，NT-3和NT-4/5。這些分泌的細胞因子被合成為前前肽，其被蛋白水解處理以產生成熟的蛋白質。所有神經營養因子都有六個保守的半胱殘基，它們參與三個二硫鍵的形成，并且在氨基酸水平上都共享約55%的序列同源性。與NGF類似，生物活性BDNF被預測為非共價連接的同源二聚體。BDNF可以與低親和力細胞表面受體LNGFR結合，該受體也結合其他神經營養因子，如NGF，NT-3和NT-4。然而，BDNF通過高親和力細胞表面受體gp145/trkB發出信號來介導其神經營養特性。
翌圣Human BDNF ELISA(酶聯免疫吸附測定)試劑盒是一種體外酶聯免疫吸附測定試劑盒，用于定量測定血清、血漿中的人腦源性神經營養因子(Human BDNF)。特異性抗人腦源性神經營養因子抗體預包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本，經過孵育，樣本中存在的人腦源性神經營養因子與固相抗體結合。洗滌去除未結合的物質后，加入檢測抗體孵育結合，經洗滌，再加入酶結合物(Streptavidin-HRP)孵育結合。洗滌后，加入顯色底物 TMB，避光顯色。顏色反應的深淺與樣本中人腦源性神經營養因子的濃度成正比。加入終止液終止反應，在450 nm 波長(參考波長570 - 630 nm)測定吸光度值。
產品信息
貨號 | 97055ES48 / 97055ES96 |
規格 | 48 T / 96 T |
檢測范圍 | 15.63-1000 pg/mL |
檢測方法 | 雙抗夾心法 |
檢測物種 | 人 |
檢測時長 | 4.5小時 |
靈敏度 | 10.1 pg/mL |
稀釋線性 | 83 - 117% |
回收率 | 81 - 117% |
板內差 | 5.5% |
板間差 | 9.6% |
實驗數據
標曲數據
數據擬合繪制標準曲線，生成的標曲用于實驗數據分析。
靈敏度檢測
BDNF的低檢測限為10.1 pg/mL，通過使用重復檢測20次零孔OD值的均值與標準差計算得出。
精密度檢測
酶標板內精密度
3個已知濃度的樣本酶標板內重復測定8次，評估酶標板內的精密度。
酶標板間精密度
3個已知濃度的樣本酶標板間重復檢測24次，評估酶標板間的精密度。
項目 | 板內精密度 | 板間精密度 | ||||
樣本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
8 | 8 | 8 | 24 | 24 | 24 | |
平均值 | 467.3 | 153.2 | 50.5 | 429.1 | 138.2 | 52.8 |
標準差 | 22.3 | 7.9 | 3.4 | 32.6 | 14.9 | 5.6 |
變異系數（%） | 4.8% | 5.2% | 6.7% | 7.6% | 10.8% | 10.5% |
回收率檢測
通過不同水平的BDNF添加于樣本中來測定回收率，其回收率如下:
樣本類型 | 平均回收率(%) | 范圍（%） |
血清 | 90.7 | 82-99.6 |
血漿 | 103.7 | 97.7-116.6 |
細胞培養上清 | 98.3 | 80.5-113.3 |
稀釋線性檢測
血清稀釋比例 | 平均期望值(%) | 范圍（%） |
1:02 | 97.1 | 87.3-103.5 |
1:04 | 97.9 | 92.2-104.1 |
1:08 | 103.1 | 88.6-115 |
1:16 | 100.4 | 88.6-115.4 |
血漿稀釋比例 | 平均期望值(%) | 范圍（%） |
1:02 | 107.1 | 97.3-116.9 |
1:04 | 101.4 | 94.3-108.9 |
1:08 | 100.5 | 86.5-116.8 |
1:16 | 108.2 | 92.5-116.6 |
細胞培養上清稀釋比例 | 平均期望值(%) | 范圍（%） |
1:02 | 97.1 | 90.3-100.8 |
1:04 | 98.6 | 96.7-101.8 |
1:08 | 91.4 | 86.5-100.5 |
1:16 | 88.4 | 82.7-99.4 |
樣本值
應用本試劑盒，檢測若干健康志愿者的樣本，志愿者的用藥史不詳。
樣本類型 | 樣本數目 | 平均值（pg/mL） | 樣本值（pg/mL） |
血清 | 8 | 17.5 | 7.9-29.4 |
血漿 | 8 | 12.7 | 3.8-23.2 |
細胞培養上清 | 4 | n.d. | n.d. |
n.d. 指樣本濃度值低于檢測范圍內得15.63 pg/mL
測定特異性
本試劑盒識別天然和重組人腦源性神經營養因子。下述因子進行了特異性的評估，沒有觀察到明顯的交叉反應和干擾影響。
Recombinant human: | Recombinant Mouse: | ||
IL-1α | CNTF | IL-1β | β-NGF |
IL-1β | β-NGF | IL-2 | NGF R |
IL-2 | NGF R | IL-4 | NT-4 |
IL-4 | NT-3 | IL-6 | TrkB |
IL-5 | NT-4 | IL-10 | TrkC |
IL-6 | TrkA | IL-12 | |
IL-8 | TrkB | ||
IL-10 | TrkC | ||
IL-12 | |||
檢測簡圖
疑問解答
問題 | 造成原因 | 解決方法 |
標曲不好 | 移液量不準確 | 檢查移液器，按時校準，仔細操作，充分混勻時蓋緊管口并盡量避免泡沫。 |
稀釋方法不恰當 | ||
顯色值偏低 | 孵育時間太短 | 給予足夠的孵育時間，樣本和溶解的標準品隔夜后更換。 |
移液量不足或稀釋不當 | 校準移液器和規范操作 | |
CV偏高 | 酶標板清洗不當 | 使用正確的洗滌工序；如果使用洗板機，檢查所有的端口是否堵塞。 |
受污染的洗液 | 準備新鮮洗液 | |
靈敏度較低 | 試劑盒儲存不當 | 按照產品組分表進行保存。 |
