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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
初級(jí)會(huì)員·12年
20439ES20重組人泛素連接酶E3(UBE3)
| 參考價(jià): | ￥ 1355 |
| 訂貨量: | 1件 |
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)- 20439ES20 產(chǎn)品型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問(wèn)次數(shù)：473更新時(shí)間：2022-11-21 13:49:14
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 20ul |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | 20439ES20 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格（元） |
Recombinant Human Ubiquitin Ligase E3(UBE3) 重組人泛素連接酶E3(UBE3) | 20439ES20 | 20 µL | 1,355 |
重組人泛素連接酶E3(UBE3)描述
泛素化是通過(guò)三個(gè)酶促步驟實(shí)現(xiàn)的。在ATP依賴的過(guò)程中，泛素激活酶(E1)催化與泛素形成活性硫酯鍵，然后轉(zhuǎn)移到泛素載體蛋白的活性位點(diǎn)半胱an酸(E2)。泛素級(jí)聯(lián)對(duì)特定底物蛋白的選擇性依賴于E2結(jié)合酶(細(xì)胞中包含的相對(duì)較少)和泛素-蛋白連接酶(E3)之間的相互作用，迄今為止已經(jīng)鑒定出600多種這種酶。E3s是一個(gè)大的，多樣化的蛋白質(zhì)組，其特征是幾個(gè)確定的基序之一。這些包括HECT(與e6相關(guān)蛋白c端同源)，RING(真正有趣的新基因)或U-box(沒(méi)有Zn2+結(jié)合配體的完整補(bǔ)充的修飾的RING基序)結(jié)構(gòu)域。而HECT E3s在泛素化過(guò)程中具有直接的催化作用，RING和U-box E3s促進(jìn)蛋白質(zhì)泛素化。 后兩種E3類型充當(dāng)適配器類分子。 它們使E2和底物足夠接近，從而促進(jìn)底物的泛素化。雖然許多RING-type e3，如MDM2和c-Cbl，可以單獨(dú)發(fā)揮作用，但其他一些是作為更大的多蛋白復(fù)合體的組成部分，如后期促進(jìn)復(fù)合體。綜上所述，這些多面的特性和相互作用使E3s能夠利用泛素-蛋白酶體系統(tǒng)，在真核生物的所有細(xì)胞中提供一種強(qiáng)大而具體的蛋白質(zhì)清除機(jī)制。E3s的重要性突出體現(xiàn)在其調(diào)節(jié)的正常細(xì)胞過(guò)程的數(shù)量，以及與其功能喪失或靶向不當(dāng)相關(guān)的疾病的數(shù)量。
產(chǎn)品性質(zhì)
產(chǎn)品組分
組分 | 規(guī)格 |
重組人泛素連接酶E3 | 20 μL |
修飾底物蛋白 | 20 μL |
反應(yīng)緩沖液配方
名稱 | 組分 | 濃度 |
10 ×Reaction Buffer (200 μL) | Tris PH 8.0 | 500 mM |
DTT | 6 mM | |
ddH2O | to 200 μL |
10 × ATP-Mg (200 μL）
| ATP | 100 mM |
MgCl2 | 100 mM | |
ddH2O | to 200 μL |
陽(yáng)性反應(yīng)體系
組分 | 體積 (μL) |
ddH2O | to 20 μL |
10 × Reaction Buffer | 2 μL |
10 × E1 Enzyme | 2 μL |
5 × Ubiquitin | 4 μL |
10 × ATP-Mg | 2 μL |
20 × E2 Enzyme | 1 μL |
10 × E3 Ligase Itch (Positive control) | 2 μL |
20 × S5a substrate (Positive control) | 1 μL |
反應(yīng)條件
37℃孵育（30 min-2 h，如果效果不明顯可增加反應(yīng)時(shí)間12 h），建議使用PCR儀或金屬浴。
結(jié)果檢測(cè)
1. 取樣品20 μL加入5 μL的5× SDS-PAGE Buffer（加入1 μL新鮮配制的1M DTT），加熱樣品95℃ 5 min，隨后使用還原性（含DTT）上樣緩沖液進(jìn)行SDS-PAGE電泳分析;
2. 選擇E3 Ubiquitin Ligase、泛素、Substrate抗體進(jìn)行Western-blot分析。
運(yùn)輸與保存方法
冰袋運(yùn)輸。-20℃至-80℃保存，1年有效期。建議第一次使用時(shí)分裝凍存，避免反復(fù)凍融。
注意事項(xiàng)
1. 避免反復(fù)凍融。
2. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
3. 本產(chǎn)品僅作科研用途！
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