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供貨周期 | 現貨 | 規格 | 10T |
---|---|---|---|
貨號 | 11148ES10 | 應用領域 | 醫療衛生,化工,生物產業 |
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規格 | 價格(元) |
Hifair® miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit(加A法) A尾法miRNA第一鏈cDNA反轉錄試劑盒 | 11148ES10 | 10 T | 995.00 |
11148ES50 | 50 T | 3,985.00 |
產品描述
microRNA是一類被廣泛關注的非編碼RNA,長度為22 nt左右,對植物和動物的基因表達有著非常重要的調控作用。A尾法miRNA第一鏈cDNA反轉錄試劑盒本試劑盒采用加A尾法來進行miRNA第一鏈cDNA的反轉錄,產品中的2×Hifair® miRNA RT buffer包含了miRNA加A尾反應和逆轉錄反應的所有原料和引物,并經過精心優化,可保證miRNA 3'末端的Poly(A)修飾過程和逆轉錄過程同時高效進行。
本產品推薦與本公司的Hieff® miRNA Universal qPCR SYBR Master Mix(Cat#11171)配套使用,以獲得*的實驗結果。
產品組分
組分編號 | 組分名稱 | 產品規格 | |
11148ES10(10 T) | 11148ES50(50 T) | ||
11148-A | Hifair® miRNA RT enzyme mix | 17.5 μL | 87.5 μL |
11148-B | 2×Hifair® miRNA RT buffer | 50 μL | 2.5 mL |
11148-C | RNase-free H2O | 2 mL | 100 mL |
11148-D | Universal Reverse Primer (10 μM) | 40 μL | 2 mL |
11148-E | U6 Forward Primer (10 μM) | 40 μL | 200 μL |
11148-F | U6 Reverse Primer (10 μM) | 40 μL | 200 μL |
運輸與保存方式
操作步驟
一、體系配制
室溫融化Hifair® miRNA RT enzyme mix和2×Hifair® miRNA RT buffer后輕微顛倒混勻,置于冰上并按下表配置反應體系:
組分 | 體積 (μL) | 終濃度 |
2×Hifair® miRNA RT buffer | 5 | 1× |
Hifair® miRNA RT enzyme mix | 1.75 | - |
RNA* | - | X |
RNase-free H2O | Up to 10 | - |
*總RNA及提取的miRNA的濃度范圍10 pg-2 μg,合成的miRNA拷貝數低可達60 copies,投入體積不超過3.25 μL。
二、逆轉錄程序
移液器輕輕混勻上述配制的反應液,按下表程序進行miRNA的逆轉錄反應:
反應溫度 | 反應時間 | 備注 |
37℃ | 50 min | miRNA加A尾及反轉錄過程 |
85℃ | 5 sec | 酶失活過程 |
【注】:逆轉錄產物可直接進行下游qPCR檢測。為避免逆轉錄體系對qPCR反應的抑制,可將產物稀釋10-1000倍后使用。若短時間內不進行下游實驗,可放置于-20℃保存。若長期保存,建議分裝后,于-80℃保存,避免反復凍融。
注意事項:
1)使用前,將凍存的各組分充分融解并輕輕混勻后使用。
2)實驗時,請使用無RNase污染的耗材,避免不必要的損失影響實驗結果。
3)本產品避免反復凍融,配制時應避免強光照射。
4)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
5)本產品僅作科研用途!
相關產品
產品名稱 | 產品編號 | 規格 |
Hieff® miRNA Universal qPCR SYBR Master Mix(加A法) | 11171ES03 | 1 mL |
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HB211216