聯系電話
翌圣生物科技（上海）股份有限公司
初級會員·12年
具體成交價以合同協議為準
- 聯系人：
- 曹女士
- 電話：
- 400-6111-883
- 手機：
- 售后：
- 4006-111-883
- 傳真：
- 86-21-34615995
- 地址：
- 上海市浦東新區天雄路166弄1號3樓
- 網址：
- www.yeasen.com
掃一掃訪問手機商鋪
產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 規格 | 50T |
|---|---|---|---|
| 貨號 | 19221ES50 | 應用領域 | 生物產業 |
產品介紹
MolPure® Cell/Tissue Total RNA Kit
產品描述
MolPure® Cell/Tissue Total RNA Kit采用MolPure® DNA清除/RNA吸附通用柱技術和和新型的溶液體系，適用于從多種新鮮或凍存的動物組織或培養細胞中高效率提取高純度、高質量的總RNA。提取過程不需要用到有毒的酚、氯仿、β-巰基乙醇等有機溶劑，也不需要用到耗時的異丙醇或乙醇沉淀。操作簡便，15 min即可完成動物組織或細胞(10-30 mg動物組織或 (1-10)×106個動物細胞)總RNA的提取。試劑盒內的MolPure® DNA清除/RNA吸附通用柱可輕松過濾除去基因組DNA和高效吸附RNA。提取的總RNA純度高，可用于RT-PCR、qPCR、分子克隆和RNase保護分析等多種分子生物學實驗。
產品組分
編號 | 組分名稱 | 19221ES08 (5 T) | 19221ES50 (50 T) |
19221-A | DNA清除/RNA吸附通用柱(MolPure® DNA removing/RNA binding Column A2) | 10個 | 100個 |
19221-B | 2 mL收集管 (2 mL Collection Tube A2) | 10個 | 100個 |
19221-C | 裂解液LB (LB Buffer A2) | 3 mL | 30 mL |
19221-D | 去蛋白液PL (PL Buffer A2) | 4 mL | 40 mL |
19221-E | 結合液BD* (BD Buffer A2*) | 1 mL | 10 mL |
19221-F | 漂洗液W* (Wash Buffer A2*) | 1.3 mL | 13 mL |
19221-G | RNase-free H2O | 1 mL | 5 mL |
運輸和保存方法
常溫運輸。室溫避光保存，有效期24個月。2-8℃可保存更長時間。
注意事項
1. 避免試劑長時間暴露于空氣中產生揮發、氧化、pH值變化，各溶液使用后應及時蓋緊蓋子。
2. 注意觀察各溶液是否有析出或渾濁（尤其冬季等室溫為低溫環境時），可37℃溫浴復溶至溶液澄清，避免影響使用效果。
3. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
4. 本產品僅作科研用途！
實驗前準備
1. 自備設備和試劑：臺式離心機、水浴鍋或金屬浴，1.5 mL RNase-free離心管，液氮，無水乙醇等。
2. 本試劑盒可以抑制RNase活性，不需要低溫離心，所有的離心步驟常溫進行。
3. 使用前，在結合液BD*（19221-E）瓶中加入標簽量的無水乙醇（5 T/50 T分別加入2.4 mL/24 mL無水乙醇），充分混勻后使用，并做好標記。
4. 使用前，在漂洗液W*（19221-F）瓶中加入標簽量的無水乙醇（5 T/50 T分別加入5.2 mL/52 mL無水乙醇），充分混勻后使用，并做好標記。
操作方法
一、樣本預處理
針對動物組織：新鮮組織(< 20 mg)加入350 μL裂解液LB，用玻璃勻漿器或電動勻漿器將組織研磨均勻。若用液氮研磨，需磨成細粉后再加入對應量的裂解液LB，劇烈震蕩20 s，充分混勻。
針對貼壁細胞：不需消化，直接裂解；或離心收集細胞后，加入350 μL裂解液LB (< 5×106個細胞)，用移液器反復吹打混勻(直到看不到細胞團為止)。
針對懸浮細胞：直接離心收集細胞，加入350 μL裂解液LB (< 5×106個細胞)，用移液器反復吹打混勻(直到看不到細胞團為止)。
【注】：組織量20-30 mg加入600 μL裂解液LB
【注】：(5-10)×106個細胞加入600 μL裂解液LB
二、RNA提取
1. 將處理好的勻漿液加到DNA清除/RNA吸附通用柱上(柱子放在2 mL收集管內)，13,000 rpm離心1 min，收集含有RNA的濾液。
2. 精確估算濾液體積中加入等體積的結合液BD*(請先確認已加入無水乙醇!)，立即輕柔吹打混勻。
3. 將上述混合液全部加入新的DNA清除/RNA吸附通用柱中，13,000 rpm離心30 s，棄掉濾液。
4. 加入700 μL去蛋白液，室溫30 s，13,000 rpm離心30 s，棄掉濾液，將DNA清除/RNA吸附通用柱重新放回2 mL收集管中。
5. 加入500 µL漂洗液W*(請先確認已加入無水乙醇!)，13,000 rpm離心30 s，棄掉濾液。
6. 重復一遍步驟5，將DNA清除/RNA吸附通用柱重新放回2 mL收集管內。
7. 空柱13,000 rpm離心2 min，除去殘留漂洗液W*。
8. 將DNA清除/RNA吸附通用柱放入新的1.5 mL RNase-free離心管中，在膜中央加入30-50 µL RNase-free H2O，室溫放置1 min，然后13,000 rpm離心1 min，收集濾液，即為RNA溶液。樣品可置于-80℃長期保存。
【注】：可通過以下方式提高回收產量：①65℃預熱RNase-free H2O；②將RNA濾液再次上柱，室溫放置1 min后，洗脫。
HB230110
