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產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 規格 | 50 T |
|---|---|---|---|
| 貨號 | 13280ES50 | 應用領域 | 生物產業 |
產品介紹
Hieff® Multiplex PCR Master Mix
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規格 | 價格（元） |
Hieff® Multiplex PCR Master Mix | 13280ES60 | 100 T | 875.00 |
Hieff® Multiplex PCR Master Mix | 13280ES76 | 500 T | 3165.00 |
產品描述
本產品適用于多重PCR實驗。Hieff® Multiplex PCR Master Mix為多重PCR酶制劑與擴增緩沖液的2×預混液，可以快速便捷地用于PCR反應，具備高均一性、高特異性和高靈敏度的特點，可以對20對及以上的引物進行特異、均一地進行擴增反應。
產品組分
組分編號 | 組分名稱 | 產品編號/規格 | |
13280ES60 (100T) | 13280ES76 (500T) | ||
13280-A | Hieff® Multiplex PCR Master Mix | 2×1.25 mL | 10×1.25 mL |
運輸與保存方式
冰袋運輸。-20℃儲存，有效期1年。
反應體系
組分 | 體積 μL | 終濃度 |
Hieff® Multiplex PCR Master Mix | 25 | 1× |
Primer mix | x | 0.1 μM-0.5 μM |
模板DNA | DNA總量：1 ng-200 ng | - |
無菌超純水 | up to 50 | - |
【注】： 1）上表中DNA量和引物濃度均為推薦濃度，可根據具體實驗情況進行調整適濃度。
2）每條引物的濃度可在0.1 μM-0.5 μM范圍內進行調整。
3）Hieff® Multiplex PCR Master Mix中已經包含擴增所需要的酶、dNTP、鹽離子等，無需額外添加。
擴增程序
循環步驟 | 溫度（℃） | 時間 | 循環數 |
預變性 | 94 | 1 min | 1 |
變性 | 94 |
| 15-45 |
退火 | 50-60 | 60 sec | |
延伸 | 72 | 60 sec/kb | |
終延伸 | 72 | 10 min | 1 |
【注】： 1）在PCR儀上設置上表中的反應程序進行多重PCR反應（設置熱蓋溫度至105℃左右）。
2）使用本產品獲得的擴增產物無需添加上樣緩沖液，可直接上樣用于電泳檢測。
3）延伸時間以長擴增片段為準，可適當延長延伸時間，但要避免過長時間的延伸帶來的非特異性擴增。
實驗案例分享
以人基因組DNA為模板，使用10對引物進行多重PCR反應，分別擴增97 bp、139 bp、181 bp、212 bp、268 bp、331 bp、415 bp、507 bp、741 bp和1172 bp的目的片段。
反應體系配制
組分 | 體積 （μL） | 終濃度 |
Hieff® Multiplex PCR Master Mix | 25 | 1× |
Primer mix | x | 0.1 μM-0.5 μM |
模板DNA | DNA總量：1 ng-200 ng | - |
無菌超純水 | up to 50 | - |
擴增程序
循環步驟 | 溫度（℃） | 時間 | 循環數 |
預變性 | 94 | 1 min | 1 |
變性 | 94 |
| 35 |
退火 | 60 | 60 sec | |
延伸 | 72 | 60 sec/kb | |
終延伸 | 72 | 10 min | 1 |
電泳檢測
2%瓊脂糖凝膠；電壓130 V；電泳時間30 min。
實驗結果
M：100 bp DNA ladder
Lane1-2：10重PCR產物
HB200511
