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供貨周期 | 現貨 | 規格 | 1 ML |
---|---|---|---|
貨號 | 10105ES03 | 應用領域 | 醫療衛生,化工,生物產業 |
2×Hieff® Robust pcr Master Mix (No Dye)
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規格 | 價格(元) |
2×Hieff® Robust PCR Master Mix (No Dye) | 10105ES03 | 1 mL | 65.00 |
2×Hieff® Robust PCR Master Mix (No Dye) | 10105ES08 | 5×1 mL | 265.00 |
產品描述
2×Hieff® Robust pcr Master Mix (No Dye)選用改造的Taq DNA Polymerase,添加強力延伸因子、擴增增強因子以及優化的緩沖體系,擴增速度和擴增產量較普通PCR Mix有了質的飛躍。擴增速度可達15 sec/kb,適用于快速PCR反應,1 kb以內的極限擴增速度可達5 sec/kb,大幅節省PCR反應時間。預混液中含有dNTP、Mg2+,使用時只需加入引物和模板即可進行擴增,大大簡化實驗的操作步驟。體系中加入的保護劑使得 Master Mix 經過反復凍融后仍可保持穩定的活性。PCR產物的3’端帶A,可輕松克隆至T載體。本產品中不含染料,PCR產物需加入Loading buffer 后進行電泳。
PCR反應體系(推薦冰上配制)
組分 | 體積 | 終濃度 |
模板DNA | 適量 | - |
Primer正向 (10 μM) | 2.5 μL | 0.5 μM |
Primer反向 (10 μM) | 2.5 μL | 0.5 μM |
2×Hieff® Robust PCR Master Mix(No Dye) | 25 μL | 1× |
H2O | to 50 μL | - |
【注】:使用前請務必將其混勻。
a)模板使用量:人基因組DNA:30-100 ng;大腸桿菌基因組DNA:10-100 ng;λDNA:0.5-5 ng;質粒DNA:0.1-10 ng。
b)Mg2+濃度:本產品中含有3 mM的MgCl2,適合大部分PCR反應。
PCR擴增條件
循環步驟 | 溫度(℃) | 時間 | 循環數 |
預變性 | 94 | 3-5 min | 1 |
變性 | 94 | 10 sec | 30-35 |
退火 | 55 | 20 sec | |
延伸 | 72 | 15-30 sec/kb | |
終延伸 | 72 | 5 min | 1 |
【注】:a)退火溫度:請參考引物的理論Tm值,退火溫度可設置低于引物理論值1-2℃。
b)延伸速度:長度1 kb以內的基因可選擇5-15 sec/kb。
運輸和保存方法
冰袋運輸。-20℃保存,有效期2年。
注意事項
1)PCR反應體系需在冰上配制,體系混勻后快速置于PCR儀進行反應。
2)本產品PCR產物不適用于聚丙烯酰胺凝膠電泳。
3)為了您的安全和健康,請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
4)本產品僅作科研用途!
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HB210805