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參考價: | ¥ 1215 |
訂貨量: | 1 件 |
- 5× Hieff Canace 產品型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產商 廠商性質
- 上海市 所在地
訪問次數(shù):623更新時間:2023-02-22 16:47:43
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- 網(wǎng)址:
- www.yeasen.com
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1 mL |
---|---|---|---|
貨號 | 10137ES03 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產業(yè) |
主要用途 | 高通量測序領域中多重PCR文庫構建 |
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規(guī)格 | 價格(元) |
5× Hieff Canace® PCR Master Mix高保真pcr預混液(for Multiplex PCR) | 10137ES03 | 1 mL | 1215.00 |
10137ES08 | 5×1 mL | 3065.00 | |
10137ES25 | 25×1 mL | 11165.00 | |
10137ES76 | 500 mL | 178655.00 |
產品描述
5× Hieff Canace® PCR Master Mix高保真pcr預混液 (for Multiplex PCR)是基于新一代高保真DNA聚合酶Canace開發(fā)的,針對于高通量測序領域中多重PCR文庫構建應用專門優(yōu)化的。Canace酶基于Pyrococcus furiosis DNA Polymerase,經(jīng)基因工程改造而成。其蛋白結構包含5’→3’聚合酶結構域和經(jīng)過改造的3’→5’外切酶結構域。這種組合大幅度提升了酶的耐熱性,保真性。耐熱溫度達到98℃,保真性是Taq DNA聚合酶的52倍,普通Pfu DNA聚合酶的6倍。酶溶液中添加了*的延伸因子,擴增速度達到15 sec/kb。本產品為5×mix PCR混合液,可添加的模板、引物體積范圍大,使您的實驗更加靈活(本公司另有2×mix可供選擇,Cat.10138)。
產品應用
多重PCR文庫構建。
運輸與保存方法
冰袋運輸。-20℃保存。有效期2年。
注意事項
1.為了您的安全和健康,請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
2.值得注意的是,多重PCR建庫實驗本身具有一定的難度,通常需要進行優(yōu)化,如您在使用本產品時遇到困難,可聯(lián)系我們的技術支持,我們有多重優(yōu)化方案,可幫助您更好的構建實驗體系。
3.本產品僅作科研用途!
PCR反應體系(推薦冰上配制)
組分 | 體積 μL |
ddH2O | to 50 |
DNA模板 | X |
Primer mix (X μM) | X |
5×Hieff Canace® PCR Master Mix (for Multiplex PCR) | 10 |
【注】:
1)試劑使用:使用前要充分解凍混勻。
2)引物與模板:第一輪多重PCR進行target enrichment,其中的引物和模板條件需要自行摸索。
第二輪多重PCR引物的濃度建議使用:10 μM引物 加2 μL左右。
第一輪PCR擴增程序:
循環(huán)步驟 | 溫度(℃) | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預變性 | 98℃ | 3 min | 1 |
變性 | 98℃ | 20 sec | 15-45 |
退火/延伸 | 60℃ | 4-10 min | |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
【注】:
在PCR儀上設置上表中的反應程序進行多重PCR反應(設置熱蓋溫度至105℃左右)。
退火/延伸時間:100重PCR推薦4 min;1000重推薦8-10 min需要自己根據(jù)引物情況摸索。
PCR產物磁珠純化
建議在50 μL 反應體系中加45 μL磁珠(Cat:12601)進行產物純化。
第二輪PCR擴增程序:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預變性 | 98℃ | 30 sec | 1 |
變性 | 98℃ | 15 sec | 25-35(可自行優(yōu)化) |
退火 | 60℃ | 30 sec | |
延伸 | 72℃ | 1 min | |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
【注】:退火溫度和時間:推薦使用60℃,也可根據(jù)需要,設立溫度梯度去摸索引物退火的最適溫度。推薦退火時間設置為30 sec,可以在10-30 sec內調節(jié)。退火時間太長可能導致擴增產物在膠上呈彌散狀。
PCR產物磁珠純化
建議在50 μL 反應體系中加45 μL磁珠(Cat:12601)進行產物純化。
HB210831