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產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 規格 | 1ml |
|---|---|---|---|
| 貨號 | 12601ES03 | 應用領域 | 醫療衛生,化工,生物產業 |
產品介紹
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規格 | 價格（元） |
Hieff NGS® DNA Selection Beads DNA分選磁珠 | 12601ES03 | 1 mL | 296.00 |
12601ES08 | 5 mL | 986.00 | |
12601ES56 | 60 mL | 6286.00 | |
12601ES75 | 450 mL | 26186.00 |
產品描述
Hieff NGS® DNA Selection Beads基于SPRI (Solid Phase Reverse Immobilization)原理，配合精心優化過的緩沖體系，可用于二代測序文庫構建過程中的DNA段分選、純化。本產品可適用于各品牌的DNA、RNA建庫試劑盒，和目前廣泛使用的AMPure XP Beads使用方式相同，片段回收效率和文庫大小分布均與AMPure XP Beads高度吻合。
運輸與保存方法
冰袋運輸。2-8℃保存，效期一年。避免冷凍！
注意事項
1）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
2）磁珠使用前須在室溫平衡至少30 min。
3）80%乙醇需現用現配，否則將影響回收效率。
4）進行長度分選時，初始樣品體積需≥100μL，不足時請用超純水補齊。樣品體積太小，將導致移液誤差增大，進而影響分選的準確性。
5) 本產品僅用作科研用途！
使用方法
1. 準備工作
將磁珠由冰箱中取出，室溫平衡至少30 min。配制80%乙醇。
2. 長度分選（雙輪法）
長度分選操作流程如圖1所示，具體操作如下。
圖1雙輪分選操作流程
1）請渦旋振蕩或充分顛倒磁珠以保證混勻。
2）根據要求，參考表1向DNA溶液中加入第一輪分選磁珠，渦旋混勻或移液器吹打10次混勻。
3）室溫孵育5 min。
4）將離心管短暫離心并置于磁力架中，待溶液澄清后（約5 min），小心轉移上清到干凈的離心管中。
注意：轉移上清時，請殘留2 μL液體于管底，切勿全部吸出上清，避免吸到磁珠并影響分選效果。
舉例：當初始體積為100 μL，第一輪使用0.8×比例，即加入80 μL磁珠，推薦吸出178 μL的上清。
5）參考表1向上清中加入第二輪分選磁珠。
6）渦旋混勻或移液器吹打10次混勻，室溫靜置5 min。
7）將離心管短暫離心并置于磁力架中，待溶液澄清后（約5 min），小心移除上清。
8）保持離心管始終處于磁力架中，加入200 μL新鮮配制的80%乙醇漂洗磁珠，室溫孵育30 s，小心移除上清。
9）重復步驟8。
10）保持離心管始終處于磁力架中，開蓋干燥磁珠至剛剛出現龜裂（約5 min）。
注意：切記磁珠不要干燥時間太久，磁珠干燥過度將影響純化效果。
11）將離心管從磁力架中取出，加入適量ddH2O（≥20 μL），渦旋振蕩或使用移液器輕輕吹打充分混勻，室溫孵育5 min。
12）將離心管短暫離心并置于磁力架中分離磁珠和液體。待溶液澄清后（約5 min），小心吸取上清至干凈的管中，即完成分選。
3. DN片段分選參考條件
通過超聲法將小牛胸腺DNA進行片段化，制備100-1000 bp的Smear片段，根據表1進行雙輪分選。結果使用Agilent 2100 Bioanalyzer進行分析（圖2）。
表1磁珠文庫分選推薦比例
DN片段大小 | 250-350 bp | 320-420 bp | 450-550 bp | 550-700 bp | 700-900 bp | 800-1000 bp |
第一輪體積比（Beads:DNA） | 0.80× | 0.70× | 0.60× | 0.55× | 0.50× | 0.45× |
第二輪體積比（Beads:DNA） | 0.20× | 0.20× | 0.20× | 0.15× | 0.15× | 0.15× |
注：表中“×"表示樣品DNA體積。如文庫插入片段長度為250 bp，樣品DNA體積為100mL，則第一輪分選磁珠使用體積為0.80×100 mL=80 mL；第二輪分選磁珠使用體積為0.20×100 mL=20 mL。
圖2 Agilent 2100 high sensitivity DNA chip electopherogram
Smear fragments溶于ddH2O，使用0.80×/0.20×至0.45×/0.15×磁珠進行片段分選
HB211123
