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HB170817
Hieff NGSTM RNA Cleaner
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規(guī)格 | 儲存 | 價格(元) |
Hieff NGSTM RNA Cleaner | 12602ES03 | 1 mL | 2-8℃保存 | 366.00 |
Hieff NGSTM RNA Cleaner | 12602ES08 | 5 mL | 2-8℃保存 | 1066.00 |
Hieff NGSTM RNA Cleaner | 12602ES56 | 60 mL | 2-8℃保存 | 4266.00 |
Hieff NGSTM RNA Cleaner | 12602ES75 | 450 mL | 2-8℃保存 | 38566.00 |
產品描述
Hieff NGSTM RNA Cleaner是翊圣生物自主研發(fā)的專門用于RNA純化的磁珠,本產品利用*的磁珠與緩沖液系統(tǒng),可以特異性地吸附RNA,有效去除蛋白、鹽離子和其它雜質。常用于純化去除rRNA后的總RNA樣本,體外轉錄的RNA產物,RNA標記產物以及合成的RNA等。純化后的RNA適用于RNA文庫構建、RT-PCR、qRT-PCR、芯片分析、Northern Blot和RNAi等實驗。
運輸與保存方法
冰袋運輸。2-8℃保存,效期一年。避免冷凍!
使用方法
所需額外試劑
100% 乙醇,Nuclease-free水,磁力架,Nuclease-free離心管。
實驗前準備
將RNA clean beads 從4 ℃取出,平衡至室溫(約30 min)。
純化流程
RNA純化過程如圖1所示,具體操作參考以下說明。
圖1 RNA純化流程
1. 樣本稀釋:在一個Nuclease-free PCR管中,用Nuclease-free水將0.5-5 μg總RNA稀釋至50 μL。
2. 磁珠結合:顛倒或渦旋振蕩混勻磁珠,吸取2×磁珠懸液(100 μL)加入至50 μL 的RNA樣品中,用移液器吹打6次,
使其充分混勻。室溫孵育5 min,使RNA與磁珠*結合。
3. 分離:將上述孵育后的樣品置于磁力架上5 min,待溶液澄清后,小心移除上清。
4. 漂洗:保持樣品置于磁力架上,加入200 μL新鮮配制的80%乙醇,漂洗磁珠,室溫孵育30 s,小心移除上清。
【注】:1)漂洗時使用的80%乙醇需要使用Nuclease-free水新鮮配制,防止引入RNase酶導致RNA降解。
2)建議在該輪漂洗后,室溫靜置2 min,再進行下一輪漂洗,有助于提升RNA回收效率。
5. 再次漂洗:重復步驟4,共漂洗2次。
6. 磁珠干燥:保持樣品始終處于磁力架上,開蓋空氣干燥磁珠5 min。
【注】:磁珠開蓋晾干時要避免過分干燥,如果磁珠出現龜裂,則提示磁珠過分干燥,此時RNA的洗脫效率會降低。
7. 洗脫:將樣品從磁力架上取出,加入21 μL Nuclease-free水,用移液器吹打6次以充分混勻,室溫靜置5 min。
8. 樣本轉移:將樣品置于磁力架5 min,待溶液澄清后,小心轉移上清20 μL至一個新的Nuclease-free PCR管中。
【注】:建議轉移上清時留2-3 μL液體,以免吸到磁珠影響后續(xù)實驗。得到的RNA極不穩(wěn)定,建議盡快進入后續(xù)實驗。若
要保存,請置于-80℃保存。
注意事項
1)磁珠使用前務必要回溫至室溫,并充分混勻,否則可能影響樣品的回收效率。
2)操作過程要嚴格保證無RNase酶和核酸污染。
3)80%乙醇需現用現配,否則將影響回收效率。
4)本產品和其他試劑配套使用時,請按照具體實驗說明來進行操作。
5)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
結果展示:
使用總RNA純化磁珠純化前后,RNA樣品qRT-PCR Ct值變化
RNA樣品 | 人 | 小鼠 | 擬南芥 | |||
檢測基因 | Gapdh | β-actin | Gapdh | β-actin | PP2A | TUB2 |
純化前Ct值 | 12.92 | 12.36 | 18.74 | 18.53 | 24.33 | 22.2 |
純化后Ct值 | 12.32 | 11.89 | 17.62 | 17.91 | 23.38 | 21.35 |
【注】:使用Hieff NGSTM RNA Cleaner可以有效去除影響RT-PCR的抑制劑,讓檢測結果更加真實。
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產品 | 貨號 | 規(guī)格 | 價格(元) |
Hieff NGSTM DNA selection Beads(Superior Ampure XP alternative) | 12601ES01 | 1 mL | 296.00 |
Hieff NGSTM DNA selection Beads(Superior Ampure XP alternative) | 12601ES08 | 5 mL | 986.00 |
Hieff NGSTM DNA selection Beads(Superior Ampure XP alternative) | 12601ES56 | 60 mL | 6286.00 |
Hieff NGSTM DNA selection Beads(Superior Ampure XP alternative) | 12601ES75 | 450 mL | 26186.00 |
Hieff NGSTM mRNA Isolation Master Kit | 12603ES24 | 24 T | 616.00 |
Hieff NGSTM mRNA Isolation Master Kit | 12603ES96 | 96 T | 2266.00 |