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產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 貨號 | 40125ES10 |
|---|---|---|---|
| 應用領域 | 生物產業 |
產品介紹
HB180209
Collagen, Type I , from rat tail鼠尾膠原蛋白I
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規格 | 儲存 | 價格 |
Collagen I 鼠尾膠原蛋白I | 40125ES10 | 10 mg | 4℃ | 586.00 |
40125ES50 | 50 mg | 4℃ | 2236.00 |
產品描述
膠原蛋白（Collagen）是結締組織和內臟器官外基質的主要成分，但在皮膚、肌腱、骨骼中分布。膠原蛋白在結構和遺傳學上被分為不同類型，I型膠原蛋白（Collagen, Type I）結構上是由2個α1鏈和1個α2鏈組成300nm長的異源多聚體。當用作凝膠時，膠原蛋白有助于體外培養并增強細胞特異性形態和功能的表達。膠原蛋白也可用于薄層以促進附著，應用包括研究腫瘤細胞侵襲和遷移，單核細胞，巨噬細胞的培養或分化研究，以及粒細胞和巨噬細胞的放射自顯影研究。膠原I還用于維持肝細胞功能，分化狀態和肝細胞基因轉錄水平的升高等研究。
Collagen I 鼠尾膠原蛋白I，本品是來源與鼠尾，溶于0.02M HAc溶液，濃度為3~4mg/mL，通過SDS-PAGE測定純度大于90 %，無菌。
運輸和保存方法
冰袋運輸。4℃保存，有效期1年。不可凍存。
注意事項
1） 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
2） 整個操作請于冰上進行，因室溫下膠原蛋白I可迅速成膠。
3） 整個操作請在無菌環境下無菌操作，避免污染以影響細胞生長。
使用說明
膠原蛋白I可凝膠到蓋玻片或組織培養皿上或用作細胞附著的薄膜涂層。細胞可在凝膠頂部，凝膠內或凝膠層之間培養。
薄層包被（Thin coating）程序：
【注意】：包被濃度為5-10µg/cm2，推薦濃度可*5µg/cm2。建議根據具體的細胞培養系統進行優化。
1）膠原蛋白I用0.02M乙酸稀釋配置50μg/mL工作液，膠原蛋白I不溶于中性pH溶液。
2）以5µg/cm2涂布培養皿，例如：一個35mm的培養皿的表面積約為10cm2，1~2mL的工作液足以覆蓋此皿。
3）室溫孵育1小時。
4）小心吸取剩余溶液，用PBS或無血清培養基洗滌以除去多余乙酸。
5）組織培養皿包被后可立即使用，也可風干，在2-8℃無菌條件下可貯存長達一周。
膠凝程序：
膠原蛋白I按以下步驟使其pH達到堿性時凝膠
1）將無菌5cm左右的紗布海綿貼在150mm培養皿的蓋子上來制備氨蒸氣室。用氫氧化銨使紗布飽和，把蓋子放在150mm的培養皿上，暫放置一邊。
2）將膠原蛋白I均勻涂布在要包被物的表面上，厚度可以根據需要改變，膠原蛋白I（50-100μL）足以涂覆22mm的蓋玻片。 對于直徑100mm的培養皿，每個加入約6mL; 對于60mm培養皿添加約2.3mL，對于35mm培養皿添加約1mL。
3）將涂有膠原蛋白的蓋玻片或帶有蓋子的培養皿轉移到氨蒸氣室并暴露三分鐘。
4）在無菌蒸餾水中（35mm培養皿加5mL，60mm培養皿加10mL等）浸泡涂布的蓋玻片或培養皿30min。吸取原蒸餾水并加0.5-1.0mL無菌蒸餾水，放置在層流罩中過夜。
5）吸出蒸餾水，用含血清的平衡鹽緩沖液溶液代替并保存在2-8°C。
備用膠凝程序：
1）在冰上放置以下物品：膠原蛋白I、無菌10×PBS、無菌蒸餾水、無菌1M NaOH
2）確定膠原蛋白I待使用溶液所需的zui終濃度的體積。
3）在冰上放置無菌管以收存膠原蛋白I。
4）在無菌條件下執行以下步驟。
4.1加入10×PBS（終體積/10）mL
4.2計算要使用的膠原蛋白I的體積（不要添加到管中直到步驟4.6為止）
終體積x終膠原蛋白I濃度（mg/mL）
_________________________ = 要加入的膠原蛋白量
瓶標簽上具體濃度（見具體批號）
4.3向10×PBS溶液中加入（要加入的膠原體積×0.023）mL的無菌冰冷1M NaOH
4.4向4.3溶液中加入下述體積的無菌冰冷蒸餾水：
添加蒸餾水體積=V（終）—V（膠原蛋白）—V(10× PBS）—V（1M NaOH）
4.5混合管中的物質并放入冰中。
4.6加入膠原蛋白I并計算體積，混勻，冰上備用。
5）膠原蛋白I溶液可立即使用或在冰上放置2-3小時。
6）使用時，無菌條件下將溶液加入到細胞培養裝置中37°C凝膠30min。
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