人血管內皮生長因子 (VEGF)ELISA試劑盒

使用手冊

產品貨號：DB2473-Hu

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【產品名稱】

中文名稱：人血管內皮生長因子 (VEGF)ELISA試劑盒

【包裝規格】

96T/盒

【預期用途】

僅供科研使用，定量檢測血清、血漿、組織勻漿、細胞裂解液、細胞培養上清液等相關樣本中人血管內皮生長因子 (VEGF)的濃度。

【檢測原理】

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人血管內皮生長因子 (VEGF)水平。用純化的人血管內皮生長因子 (VEGF)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入血管內皮生長因子 (VEGF)，再與HRP標記的血管內皮生長因子 (VEGF)抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血管內皮生長因子 (VEGF)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人血管內皮生長因子 (VEGF)濃度。

【產品性能】

1、物理性能

試劑盒的各液體組分應澄清透明、無沉淀或者絮狀物。微孔板鋁箔袋應真空包裝，無破損漏氣(如有漏氣，不影響使用）。

2、劑量反應曲線線性

標準品劑量反應曲線相關系數r值，大于等于0.9900。

3、檢測范圍

30 pg/ml-1200 pg/ml。

4、靈敏度

di檢出劑量小于7.5 pg/ml。

5、精密度

精密度用樣品測定值的變異系數CV 表示。CV（%） = SD/mean×100

批內差：取同批次試劑盒對低、中、高值定值樣本進行定量檢測，每份樣本連續測定20 次，分別計算不同濃度樣本的平均值及SD 值。

批間差：選取3 個不同批次的試劑盒分別對低、中、高值定值樣本進行定量測定，每個樣本使用同一試劑盒重復測定10 次，分別計算不同濃度樣本的平均值及SD 值。

批內差： CV<6.7%

批間差： CV<9.3%

6、回收率

分別往5個不同樣本中添加已知濃度的目標蛋白，做回收實驗，得出回收率范圍和平均回收率。

7、線性

分別往5個樣本中添加已知濃度的目標蛋白，做回收實驗，得出回收率范圍及平均回收率。將5個樣本分別稀釋2倍，4倍，8倍，16倍做回收實驗，得出回收率范圍及平均回收率。

8、特異性

本試劑盒識別天然和重組人血管內皮生長因子 (VEGF)，經檢測與其它相似物質無明顯交叉反應。由于受到技術及樣本來源的限制，不可能完成所有相關或相似物質交叉反應檢測，因此本試劑盒有可能與未經檢測的其它物質有交叉反應。

9、穩定性

經測定，試劑盒在有效期內務必按推薦溫度保存，活性降低率小于5%。為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響，實驗室的環境條件需盡量保持一致，尤其是實驗室內溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實驗員來進行操作可減少人為誤差。