實(shí)驗(yàn)原理

ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí)，受檢標(biāo)本（測(cè)定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。

產(chǎn)品名稱：人載脂蛋白H(Apo-H)ELISA試劑盒     

產(chǎn)品規(guī)格：96T/48T

產(chǎn)品品牌：滬鼎生物/TSZ

樣品類型：血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清等樣品類型 

檢測(cè)方法：酶聯(lián)免疫法

特 異 性：公司ELISA試劑盒具有較高的靈敏度和出色的特異性 

交叉反應(yīng)：由于當(dāng)前的酶聯(lián)免疫科學(xué)技術(shù)和知識(shí)有限，現(xiàn)有技術(shù)不可能完成藥物檢測(cè)的靶抗原之間和所有其他物種的類似物。因此，交叉反應(yīng)可能仍然存在 

樣 本 量：50-100 μL 

實(shí)驗(yàn)時(shí)間：1–4.5h 

儲(chǔ)存條件：2-8°C 

儲(chǔ)存方法：可以存儲(chǔ)在2 - 8°C長(zhǎng)達(dá)1個(gè)月（專家建議：4°C恒溫保存，酶免試劑盒實(shí)驗(yàn)效果更佳）。對(duì)于長(zhǎng)期存儲(chǔ),請(qǐng)?jiān)?20°C的存儲(chǔ)。盡量保持試驗(yàn)板在密封鋁箔袋，避免潮濕 

有 效 期：6 months 

使用優(yōu)點(diǎn)：ELISA試劑盒可特異性定量測(cè)定疾病相關(guān)蛋白，包括細(xì)胞因子、趨化因子、β淀粉樣蛋白與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)靶標(biāo)。

■靈敏，準(zhǔn)確和*的性能

■用血清、血漿、組織培養(yǎng)上清或裂解產(chǎn)物進(jìn)行過(guò)驗(yàn)證

■在半天內(nèi)可完成的現(xiàn)成，方便的檢測(cè)

一、“人載脂蛋白H(Apo-H)ELISA試劑盒”標(biāo)本要求

    在收集樣本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃，必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。對(duì)收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測(cè)的樣本，及時(shí)儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆谩?duì)于隔天再檢測(cè)的樣本，及時(shí)分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆茫袟l件的，-70℃凍存?zhèn)溆谩?biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融。

1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。

二、人載脂蛋白H(Apo-H)ELISA試劑盒使用要求

1.濃洗滌液低溫保存會(huì)有鹽析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。

2.剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會(huì)含有少許水樣物質(zhì)，此為正常現(xiàn)象，不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。

3.溫浴的時(shí)候要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板，防止水分的蒸發(fā)。

4.洗板時(shí)，每次洗液加入后，應(yīng)靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機(jī)時(shí)，倒去液體后，要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。

三、人載脂蛋白H(Apo-H)ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法

1.血清：操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2.血漿：EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3.細(xì)胞上清液：1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液

5.保存：如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

四、人載脂蛋白H(Apo-H)ELISA試劑盒操作步驟

(1）使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。

(2）根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。

(3）加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時(shí)。

(4）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。

(5）每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。

(6）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。

(7）每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。

(8）取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。

(9）在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

五、“人載脂蛋白H(Apo-H)ELISA試劑盒”*優(yōu)勢(shì)：

1.嚴(yán)格的質(zhì)控體系：所有試劑盒從原料到成品經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)控，確保試劑盒質(zhì)量及穩(wěn)定性。

2.產(chǎn)品經(jīng)過(guò)不斷優(yōu)化，具有很好的靈敏度； 

3.綜合指標(biāo)特性，研發(fā)便捷操作的試劑盒；

4.檢測(cè)驗(yàn)證樣本多樣；

5.*分裝：專業(yè)的，可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，優(yōu)秀的產(chǎn)品質(zhì)量，低廉的市場(chǎng)價(jià)格，實(shí)惠、經(jīng)濟(jì)、可靠。

6.專業(yè)的研發(fā)團(tuán)隊(duì)為客戶提供個(gè)性化的定制服務(wù)；

7.提供食品安全藥物殘留ELISA試劑盒，以及代測(cè)服務(wù)；

8.多年實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)老師，保證滬鼎生物ELISA試劑盒完善專業(yè)的售后服務(wù)；

9.高靈敏度、高精密度，高重現(xiàn)性，高特異性。不僅有高可靠性的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，更為您節(jié)約實(shí)驗(yàn)成本和時(shí)間。

六、注意事項(xiàng)

1.于2-8℃保存，有效期6個(gè)月。每次使用前應(yīng)先平衡至室溫。

2.中終止液具有腐蝕性，要小心使用。

3.未使用完的板條應(yīng)密封保存。

4.瓶蓋每次使用后要擰緊，各瓶蓋之間不可混用。不同批號(hào)試劑盒的試劑組份不可混用。

5.試驗(yàn)樣本應(yīng)為無(wú)染菌、無(wú)血脂、無(wú)溶血的血清。任何樣本都應(yīng)視為傳染源妥善處理。

七、人載脂蛋白H(Apo-H)ELISA試劑盒訂購(gòu)說(shuō)明：

1.絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨，一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。 

2.部分非常用產(chǎn)品，需提前1－2日預(yù)訂，海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。 

3.部分產(chǎn)品價(jià)格會(huì)因貨期、批次等因素發(fā)生變化，若有變動(dòng)以訂貨當(dāng)日價(jià)格為準(zhǔn)。 

4.請(qǐng)辦理完貨款后，將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、信息、等形式通知我們。

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