實驗原理

ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性，酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體，也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產物，產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。

產品名稱：人谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒    

產品規格：96T/48T

產品品牌：滬鼎生物/TSZ

樣品類型：血清、血漿、細胞培養上清等樣品類型 

檢測方法：酶聯免疫法

特 異 性：公司ELISA試劑盒具有較高的靈敏度和出色的特異性 

交叉反應：由于當前的酶聯免疫科學技術和知識有限，現有技術不可能完成藥物檢測的靶抗原之間和所有其他物種的類似物。因此，交叉反應可能仍然存在 

樣 本 量：50-100 μL 

實驗時間：1–4.5h 

儲存條件：2-8°C 

儲存方法：可以存儲在2 - 8°C長達1個月（專家建議：4°C恒溫保存，酶免試劑盒實驗效果更佳）。對于長期存儲,請在-20°C的存儲。盡量保持試驗板在密封鋁箔袋，避免潮濕 

有 效 期：6 months 

使用優點：ELISA試劑盒可特異性定量測定疾病相關蛋白，包括細胞因子、趨化因子、β淀粉樣蛋白與信號轉導靶標。

■靈敏，準確和*的性能

■用血清、血漿、組織培養上清或裂解產物進行過驗證

■在半天內可完成的現成，方便的檢測

一、“人谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒”標本要求

    在收集樣本前都必須有一個完整的計劃，必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集后當天就進行檢測的樣本，及時儲存在4℃備用。對于隔天再檢測的樣本，及時分裝后凍存在-20℃備用，有條件的，-70℃凍存備用。標本應避免反復凍融。

1.標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融

2.不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

二、人谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒使用要求

1.濃洗滌液低溫保存會有鹽析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶。

2.剛開啟的酶聯板孔中可能會含有少許水樣物質，此為正常現象，不會對實驗結果造成任何影響。

3.溫浴的時候要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發。

4.洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。

三、人谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法

1.血清：操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2.血漿：EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3.細胞上清液：1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液

5.保存：如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

四、人谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒操作步驟

(1）使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產生加樣上的誤差。

(2）根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定，能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應孔內。

(3）加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。

(4）甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。

(5）每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。

(6）甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。

(7）每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。

(8）取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。

(9）在450nm波長處測定各孔的OD值。

五、“人谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒”*優勢：

1.嚴格的質控體系：所有試劑盒從原料到成品經過嚴格的質控，確保試劑盒質量及穩定性。

2.產品經過不斷優化，具有很好的靈敏度； 

3.綜合指標特性，研發便捷操作的試劑盒；

4.檢測驗證樣本多樣；

5.*分裝：專業的，可靠的實驗結果，優秀的產品質量，低廉的市場價格，實惠、經濟、可靠。

6.專業的研發團隊為客戶提供個性化的定制服務；

7.提供食品安全藥物殘留ELISA試劑盒，以及代測服務；

8.多年實踐經驗的技術老師，保證滬鼎生物ELISA試劑盒完善專業的售后服務；

9.高靈敏度、高精密度，高重現性，高特異性。不僅有高可靠性的實驗結果，更為您節約實驗成本和時間。

六、安全性

1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。

2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。

3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

七、注意事項

1.于2-8℃保存，有效期6個月。每次使用前應先平衡至室溫。

2.中終止液具有腐蝕性，要小心使用。

3.未使用完的板條應密封保存。

4.瓶蓋每次使用后要擰緊，各瓶蓋之間不可混用。不同批號試劑盒的試劑組份不可混用。

5.試驗樣本應為無染菌、無血脂、無溶血的血清。任何樣本都應視為傳染源妥善處理。

八、人谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒訂購說明：

1.絕大部分產品備有現貨，一般情況下都能訂貨當日發貨。 

2.部分非常用產品，需提前1－2日預訂，海外期貨則需要提前3-6周預訂。 

3.部分產品價格會因貨期、批次等因素發生變化，若有變動以訂貨當日價格為準。 

4.請辦理完貨款后，將收據、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、信息、等形式通知我們。

ELISA試劑盒的必知項：

1. 水溶性、低黏度、無腐蝕、不易燃、*。

2. 所采用的方法特異性好，靈敏度、準確度、精密度。

3. 所用標準品或標準參考物符合推薦標準和要求。

4. 貯存期至少為1年。