詳細(xì)介紹
產(chǎn)品名稱:人心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:96T 48T
產(chǎn)品品牌:滬鼎生物 TSZ
樣品類型 血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清等樣品類型
檢測方法 酶聯(lián)免疫法
特 異 性 公司ELISA試劑盒具有較高的靈敏度和出色的特異性
交叉反應(yīng) 由于當(dāng)前的酶聯(lián)免疫科學(xué)技術(shù)和知識有限,現(xiàn)有技術(shù)不可能完成藥物檢測的靶抗原之間和所有其他物種的類似物。因此,交叉反應(yīng)可能仍然存在
樣 本 量 50-100 μL
實驗時間 1–4.5h
儲存條件 2-8°C
儲存方法 可以存儲在2 - 8°C長達(dá)1個月(專家建議:4°C恒溫保存,酶免試劑盒實驗效果更佳)。對于長期存儲,請在-20°C的存儲。盡量保持試驗板在密封鋁箔袋,避免潮濕
有 效 期 6 months
使用優(yōu)點 ELISA試劑盒可特異性定量測定疾病相關(guān)蛋白,包括細(xì)胞因子、趨化因子、β淀粉樣蛋白與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)靶標(biāo)。
■靈敏,準(zhǔn)確和*的性能
■用血清、血漿、組織培養(yǎng)上清或裂解產(chǎn)物進行過驗證
■在半天內(nèi)可完成的現(xiàn)成,方便的檢測
二、人心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法
1.血清:操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2.血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3.細(xì)胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4.組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5.保存:如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
三、人心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒操作步驟
1)取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置30分鐘。
2)分組:取出96孔板,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品組(6個濃度)、空白孔、待測樣品組。
3)標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:準(zhǔn)備小試管6 只,依次編好號碼,先在各小試管中加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100ul,然后取原濃度標(biāo)準(zhǔn)品100ul加入一只已編好號的試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第二支試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul加入第三只試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第四只試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul加入第五只試管中,充分混勻;然后在該試管中取100ul,棄掉。第六只試管作為0 號標(biāo)準(zhǔn)品。
注:為減少實驗誤差,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔。
4)加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入50ul的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入50ul的蒸餾水;其余微孔中先加樣品40ul然后再加生物素標(biāo)記的抗體10ul。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
5)溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
6)洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30 秒棄去,如此重復(fù)5 次,拍干。
7)加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組、待測樣本組各孔中加入50ul的酶標(biāo)溶液(空白對照孔除外)。
8)溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于37℃恒溫孵育1小時。
9)洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置15-30s,充分清洗酶標(biāo)板5次,用吸水紙*拍干。
10)顯色:各孔加入顯色劑A液50ul后,再加入顯色劑B液50ul。
11)終止:25-37℃下避光反應(yīng)10-15分鐘,加入50ul終止液。
12)讀板:在450nm波長讀取各孔的OD值。
注:讀板時必須拭干板底殘留的液體和手指痕跡,讀板時間控制在終止反應(yīng)后的30分鐘內(nèi),以免影響準(zhǔn)確性。
四、“人心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒”注意事項:
1)試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
2)實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
3)不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4)使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5)使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6)洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
7)底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手 接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
8)加入試劑的順序應(yīng)*,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
9)按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
五、“人心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒”*優(yōu)勢:
1.嚴(yán)格的質(zhì)控體系:所有試劑盒從原料到成品經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)控,確保試劑盒質(zhì)量及穩(wěn)定性;
2.產(chǎn)品經(jīng)過不斷優(yōu)化,具有很好的靈敏度;
3.綜合指標(biāo)特性,研發(fā)便捷操作的試劑盒;
4.*分裝:專業(yè)的,可靠的實驗結(jié)果,優(yōu)秀的產(chǎn)品質(zhì)量,低廉的市場價格,實惠、經(jīng)濟、可靠。
六、注意事項
1.于2-8℃保存,有效期6個月。每次使用前應(yīng)先平衡至室溫。
2.中終止液具有腐蝕性,要小心使用。
3.未使用完的板條應(yīng)密封保存。
4.瓶蓋每次使用后要擰緊,各瓶蓋之間不可混用。不同批號試劑盒的試劑組份不可混用。
5.試驗樣本應(yīng)為無染菌、無血脂、無溶血的血清。任何樣本都應(yīng)視為傳染源妥善處理。
七、訂購說明:
1.絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。
2.部分非常用產(chǎn)品,需提前1-2日預(yù)訂,海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。
3.部分產(chǎn)品價格會因貨期、批次等因素發(fā)生變化,若有變動以訂貨當(dāng)日價格為準(zhǔn)。
4.請辦理完貨款后,將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、信息、等形式通知我們。
如何降低人心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒背景的步驟:
大家都知道Elisa背景太高,會導(dǎo)致試劑盒檢測失敗,那么背景過高,而您懷疑洗滌不夠時,根據(jù)我司多年經(jīng)驗。可以嘗試增加洗滌次數(shù)。這種封鎖液便宜、不亂,在去除洗滌過程中的一些非特異結(jié)合上很有用。假如濃渡過高,或者未準(zhǔn)確稀釋,則會導(dǎo)致高背景。常用的蛋白封鎖液包括牛血清白蛋白(BSA)、脫脂奶粉、正常血清和魚明膠。封鎖液的作用是讓不相關(guān)的蛋白占據(jù)微孔板中潛伏的結(jié)合位點。ELISA實驗的原理好像很簡樸,不過乎固定抗原,添加一抗、二抗和底物,間中夾雜著洗滌和封鎖。假如您的背景過高,懷疑封鎖不充分,那么您可以嘗試使用更高濃度的封鎖液,或適當(dāng)延長封鎖時間。血清組分的內(nèi)在多樣性可使它有效攔截很多不同類型的分子相互作用。另一個選擇是使用蛋白和非離子型去污劑這兩種封鎖液,后者可協(xié)助洗滌過程中的封鎖。解決這個題目的一種方法是使用雞或魚的正常血清。好的封鎖液應(yīng)降低非特異性結(jié)合,但它不應(yīng)當(dāng)與抗原、抗體或檢測試劑發(fā)生相互作用。在實驗結(jié)束時,我們是否能獲得有意義的信息,這在很大程度上取決于結(jié)果的信噪比。
假如您的ELISA不幸地碰到了高背景,那么也無需太擔(dān)心,依次查看ELISA系統(tǒng)中的組分,并排除可能存在的題目。記住,非特異的抗體結(jié)合會增加背景。不外,它的缺點在于能與Protein A和IgG抗體相互作用。為了防止這一點,切勿使用過多的一抗或二抗。請勿使用高濃度(正常濃度為0.01-0.1%),它會降低特異結(jié)合,產(chǎn)生假陰性。這就降低了可產(chǎn)生信號的抗體非特異結(jié)合的機會。目前主要有兩種類型的封鎖液:蛋白和非離子型去污劑。您當(dāng)然也希望抗體只與目的蛋白結(jié)合吧。假如您一直被背景題目所困擾,那么也許您該花些時間來優(yōu)化封鎖液。