一、人同型半胱氨酸(Hcy)ELISA試劑盒的實驗原理

ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性，酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體，也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。

產(chǎn)品名稱：人同型半胱氨酸(Hcy)ELISA試劑盒 

產(chǎn)品規(guī)格：96T 48T

產(chǎn)品品牌：滬鼎生物 TSZ

樣品類型  血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清等樣品類型 

檢測方法  酶聯(lián)免疫法

特 異 性  公司ELISA試劑盒具有較高的靈敏度和出色的特異性 

交叉反應  由于當前的酶聯(lián)免疫科學技術和知識有限，現(xiàn)有技術不可能完成藥物檢測的靶抗原之間和所有其他物種的類似物。因此，交叉反應可能仍然存在 

樣 本 量  50-100 μL 

實驗時間  1–4.5h 

儲存條件  2-8°C 

儲存方法  可以存儲在2 - 8°C長達1個月（專家建議：4°C恒溫保存，酶免試劑盒實驗效果更佳）。對于長期存儲,請在-20°C的存儲。盡量保持試驗板在密封鋁箔袋，避免潮濕 

有 效 期  6 months 

使用優(yōu)點  ELISA試劑盒可特異性定量測定疾病相關蛋白，包括細胞因子、趨化因子、β淀粉樣蛋白與信號轉導靶標。

■靈敏，準確和*的性能

■用血清、血漿、組織培養(yǎng)上清或裂解產(chǎn)物進行過驗證

■在半天內可完成的現(xiàn)成，方便的檢測

二、人同型半胱氨酸(Hcy)ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法

1.血清：操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2.血漿：EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3.細胞上清液：1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液

5.保存：如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

三、人同型半胱氨酸(Hcy)ELISA試劑盒操作步驟

1）取出試劑盒，室溫（20-25℃）放置30分鐘。

2）分組：取出96孔板，根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)，把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設標準品組（6個濃度）、空白孔、待測樣品組。

3）標準品的稀釋：準備小試管6 只，依次編好號碼，先在各小試管中加入標準品稀釋液100ul，然后取原濃度標準品100ul加入一只已編好號的試管中，充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第二支試管中，充分混勻；再在該試管中取100ul加入第三只試管中，充分混勻；再在該試管中取100ul 加入第四只試管中，充分混勻；再在該試管中取100ul加入第五只試管中，充分混勻；然后在該試管中取100ul，棄掉。第六只試管作為0 號標準品。

注：為減少實驗誤差，保證準確性，建議設置復孔。

4）加樣：依照標準品的順序分別加入50ul的標準品溶液于空白微孔中；空白對照孔加入50ul的蒸餾水；其余微孔中先加樣品40ul然后再加生物素標記的抗體10ul。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

5）溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。

6）洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30 秒棄去，如此重復5 次，拍干。

7）加酶標溶液：標準品組、待測樣本組各孔中加入50ul的酶標溶液（空白對照孔除外）。

8）溫育：酶標板用封板紙密封后，放入濕盒內于37℃恒溫孵育1小時。

9）洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔，靜置15-30s，充分清洗酶標板5次，用吸水紙*拍干。

10）顯色：各孔加入顯色劑A液50ul后，再加入顯色劑B液50ul。

11）終止：25-37℃下避光反應10-15分鐘，加入50ul終止液。

12）讀板：在450nm波長讀取各孔的OD值。

注：讀板時必須拭干板底殘留的液體和手指痕跡，讀板時間控制在終止反應后的30分鐘內，以免影響準確性。

四、“人同型半胱氨酸(Hcy)ELISA試劑盒”保存：

1.所有試劑均按試劑瓶標簽上所示保存。請注意，收到試劑盒后請盡快將標準品、檢測溶液A、檢測溶液B以及96孔板保存于-20℃。

2.使用后的試劑盒：剩余試劑仍需按照試劑瓶標簽所示的溫度保存，開封后的酶標板要加干燥劑后密封保存于-20℃，避免潮濕。

3.試劑盒內酶標條可拆卸，按實驗需求可分多次使用。使用后的剩余試劑盒建議在*實驗后1個月內使用完畢。產(chǎn)品過期時間以盒子上的標簽為準，保質期內所有組分都確保是穩(wěn)定的。

五、注意事項

1.于2-8℃保存，有效期6個月。每次使用前應先平衡至室溫。

2.中終止液具有腐蝕性，要小心使用。

3.未使用完的板條應密封保存。

4.瓶蓋每次使用后要擰緊，各瓶蓋之間不可混用。不同批號試劑盒的試劑組份不可混用。

5.試驗樣本應為無染菌、無血脂、無溶血的血清。任何樣本都應視為傳染源妥善處理。

六、“人同型半胱氨酸(Hcy)ELISA試劑盒”的質量保證：
檢測用所有試劑全部都為進口試劑，適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本，靈敏度*。我們專業(yè)的ELISA技術服務，保證對所售任何產(chǎn)品一概負責到底，每一份實驗結果都真實可靠！
A． 嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
B． 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
C． 本試劑不同批號組分不得混用。
D. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。

七、訂貨說明

1）賣方確保所訂產(chǎn)品與目錄技術指標保持*；

2）為了確保買方產(chǎn)品在運輸中的質量，對有特殊要求的低溫產(chǎn)品予以濕冰運輸。

3）收到貨物后如出現(xiàn)質量問題，買方需在收到貨物一個月內向賣方提出書面異議。買方逾期不提出異議，視為貨物符合其要求，賣方不付任何責任。

4）出現(xiàn)質量以外的問題，如破損等，買方應在收貨后一個周內提出。買方未按時提出異議，視為該產(chǎn)品合格。

本公司對所有售出的產(chǎn)品保證質量，并提供良好的售后服務，有關產(chǎn)品質量的投訴，請在收到貨物的32天內以書面形式提出，并向我公司技術人員提供相應的材料，我們會及時派人解決。所有形式的賠償或退換僅限于產(chǎn)品本身，不涉及其他間接內容。凡購買本公司任意款elisa試劑盒，均可享受免費代測服務，并提供技術指導。

人同型半胱氨酸(Hcy)ELISA試劑盒結合物的保存

酶標抗體中的酶和抗體均為生物活性物質，保存不當，極易失活。高濃度的結合物較為穩(wěn)定，冰凍干燥后可在普通冰箱中保存一年左右， 但凍干過程中引起活力的減低，而且使用時需經(jīng)復溶，頗為不便。結合物溶液中加入等體積的甘油可在低溫冰箱或普通冰箱的冰格中較長時間保存。早期的 ELISA 試劑盒中的結合物一般均按以上兩種形式供應，配以稀釋液(見3.2.5)臨用時按標明的稀釋度稀釋成工作液。現(xiàn)在較良好的 ELISA 試劑盒均已用合適的緩沖液配成工作液，使用時不需再行稀釋，在4-8℃保存期可達6 個月。由于蛋白質濃度較低，結合物易失活，需加入蛋白保護劑。另外再加入抗生素(例如慶大霉素)和防腐劑(HRP 結合物加硫柳泵，AP 結合物可加疊氮鈉)，以防止細菌生長。