Elisa試劑盒簡單介紹：

【產品名稱】：人上皮細胞粘附分子(Ep-CAM/CD362)ELISA試劑盒

【英文名稱】：Human Epithelial Cell Adhesion Molecule,Ep-CAM ELISA KIT

【檢測種屬】：人、大鼠、小鼠等動植物。

【產品用途】：被測樣品定性或定量分析

【產品規格】：48T、96T

【檢測方法】：酶免法/酶聯免疫法(ELISA)

【保存條件】：2-8℃

【供 貨 期】：1-3天(現貨供應)

【產品性狀】：液體盒裝

【服務優勢】：全程提供ELISA實驗技術指導和ELISA試劑盒免費代測

【樣本儲存】：收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集后當天進行檢測的標本，儲存在4℃備用，如有特殊原因需要周期收集標本，將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復凍融。標本2-8℃可保存48小時，-20℃可保存1個月。-70℃可保存6個月。部分激素類標本需添加抑肽酶。

人上皮細胞粘附分子(Ep-CAM/CD362)ELISA試劑盒操作步驟

1、準備：從冰箱取出試劑盒，室溫復溫平衡30分鐘。

2、配液：用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。

3、加標準品和待測樣本：取足夠數量的酶標包被板，固定于框架上，分別設置標準品孔、待測樣本孔和空白對照孔，記錄各孔位置，在標準品孔中加入標準品50μL；待測樣本孔中先加入待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL（即樣本稀釋5倍）；每孔再加入酶標工作液100μL；空白對照孔不加。

4、溫育：37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5、洗板：棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機按說明書操作洗板）。

6、顯色：每孔先加入顯色劑A 液50μL，再加入顯色劑B液 50μL，37℃避光顯色15min。

7、終止：取出酶標板，每孔加終止液50μL，終止反應（顏色由藍色立轉黃色）。

8、測定：以空白孔調零，在終止后15分鐘內，用450nm波長測量各孔的吸光值（OD值）。

9、計算：根據標準品的濃度及對應的OD值，計算出標準曲線的直線回歸方程，再根據樣本的OD值，在回歸方程上計算出對應的樣品濃度，也可以使用各種應用軟件來計算。zui終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數。

人上皮細胞粘附分子(Ep-CAM/CD362)ELISA試劑盒的基本原理有這幾條： 

  1.抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面，可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水 性部分相互吸附，并保持其免疫學活性；  

  2.抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結合物，而此種酶結合物仍能保持其免疫學 和酶學活性； 

  3.酶結合物與相應抗原或抗體結合后，可根據加入底物的顏色反應來判定是否有免疫反 應的存在，而且顏色反應的深淺是與標本中相應抗原或抗體的量成正比例的，因此，可以按底物顯色的程度顯示試驗結果。 

人上皮細胞粘附分子(Ep-CAM/CD362)ELISA試劑盒實驗中封閉

  1.ELISA實驗中，蔗糖本身沒有封閉作用;

  2.封閉液一般是BSA、酪蛋白等或者是Tween等。

  3.加蔗糖的主要目的是保護ELISA板子吸附(包被)的蛋白，起到“保護劑”的作用。

  4.蔗糖溶液一般在ELISA板子經過BSA封閉后加，當然也有將蔗糖加到封閉液中同時進行處理。

人上皮細胞粘附分子(Ep-CAM/CD362)ELISA試劑盒的操作技術有哪些影響？

  1.合理安排檢測量，以免反應板過多造成洗板等待時間長。

  2.加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。

  3.嚴格按照試劑說明書進行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30～60min。

  4.加樣后及時放人孵箱。標本較多時，要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間，防止孵育時間人為延長，導致非特異性結合緊附于反應孔周圍，難以清洗*。

  5.封板溫育時，各孔一定要封嚴，防止陽性標本的液體蒸發，產生周邊現象從而導致“花板”的出現。