詳細介紹
一、人表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒實驗原理
ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。
二、人表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法
1.血清:操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2.血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3.細胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4.組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5.保存:如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
三、人表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒的特點:
1.專一性強。抗原與抗體的免疫反應是專一反應,而免疫酶技術以免疫反應為基礎,所檢測的對象是抗原(或抗體),使用的抗體除標記了酶以外,與普通抗體的免疫反應特性并無多大差別。
2.靈敏度高。由于抗體聯結上了酶,因此,借助于酶與底物的顯色反應,顯示抗原與抗體的結合,大大提高了檢測的靈敏性,使檢測水平接近放射免疫測定法。
3.樣品易保存。經過酶反應顯示的有色產物大多比較穩定,因此有利于樣品的保存。
4.結果易觀察。對檢測結果即可用肉眼觀察,又可用顯微鏡觀察,也可以用分光光度計進行比色測定,還可用顯微鏡觀察。這是因為某些酶反應產物能使電子密度發生改變,從而引起被檢測物的顯示。
5.可以定量測定。溶液中的抗原物質,應用酶免吸附技術進行比色測定,依據光密度值的變化,可以定量。預計用細胞分光光度計可對組織內的抗原進行免疫酶技術的定量測定。
6.可以大規模測定樣品。如有成千上萬份樣品需要進行檢測,免疫酶技術都能在較短時間內完成。
7.儀器和試劑簡單。對免疫沒技術來說,不需要熒光顯微鏡,也不需要測定放射性的特殊儀器,所用儀器及試劑均屬一般性儀器與試劑,普通實驗室及生產應用單位均易購置
四、人表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒保存:
1.所有試劑均按試劑瓶標簽上所示保存。請注意,收到試劑盒后請盡快將標準品、檢測溶液A、檢測溶液B以及96孔板保存于-20℃。
2.使用后的試劑盒:剩余試劑仍需按照試劑瓶標簽所示的溫度保存,開封后的酶標板要加干燥劑后密封保存于-20℃,避免潮濕。
3.試劑盒內酶標條可拆卸,按實驗需求可分多次使用。使用后的剩余試劑盒建議在*實驗后1個月內使用完畢。產品過期時間以盒子上的標簽為準,保質期內所有組分都確保是穩定的。
五、注意事項
1.于2-8℃保存,有效期6個月。每次使用前應先平衡至室溫。
2.中終止液具有腐蝕性,要小心使用。
3.未使用完的板條應密封保存。
4.瓶蓋每次使用后要擰緊,各瓶蓋之間不可混用。不同批號試劑盒的試劑組份不可混用。
5.試驗樣本應為無染菌、無血脂、無溶血的血清。任何樣本都應視為傳染源妥善處理。
六、公司承諾:
您于我公司購買產品人表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒后有任何疑問,都可以打給我公司業務員,我們會為您安排解決。在為了節省您寶貴的時間,我們還提供免費代實驗,只要你把樣品郵寄給我們,我們會在5-7個工作日內完成,并且保證結果。