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更新時(shí)間:2015-06-12 11:50:10瀏覽次數(shù):510
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一、簡(jiǎn)介
這些年來(lái),荷蘭動(dòng)物科學(xué)與健康研究所(ID-Lelystad)已經(jīng)建立了控制和消除動(dòng)物疾病的專業(yè)技術(shù)和知識(shí)體系。除了進(jìn)行病因和致病機(jī)理的基礎(chǔ)性研究外,該研究所還為的專業(yè)實(shí)驗(yàn)室和獸醫(yī)服務(wù)機(jī)構(gòu)提供了病毒學(xué)、細(xì)菌學(xué)、寄生蟲學(xué)和免疫學(xué)研究工具。
牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)屬于黃病毒科、瘟病毒屬,分為引起細(xì)胞病變的病毒株和不引起細(xì)胞病變的病毒株。該病毒呈世界性分布,血清抗體陽(yáng)性率為50-90%。大部分(70%)免疫系統(tǒng)完善的抗體陰性成年牛表現(xiàn)為亞臨床的急性感染。潛伏期為一周,隨后出現(xiàn)短暫的發(fā)熱、白細(xì)胞減少和病毒血癥,zui長(zhǎng)持續(xù)15天。血清抗體也在此時(shí)期出現(xiàn)。可能出現(xiàn)的臨床癥狀有精神沉郁、食欲不振、流鼻涕和腹瀉。幼年動(dòng)物偶爾可出現(xiàn)嚴(yán)重的臨床癥狀,因?yàn)椴《镜拿庖咭种谱饔每梢饳C(jī)會(huì)致病原的雙重感染。
免疫系統(tǒng)完善動(dòng)物的*感染可通過(guò)血清轉(zhuǎn)化(抗體滴度從不能檢出至可檢出或抗體滴度增加4倍)作出診斷。兩次采血的時(shí)間分別在急性感染期間和*次采血至少4周以后。在年輕哺乳牛,母源抗體可在血清中持續(xù)存在100到200-400天。
懷孕期間感染BVDV,如果病毒通過(guò)胎盤垂直傳播,則可能導(dǎo)致胎兒感染。根據(jù)胎兒的年齡不同,感染可造成胎兒重吸收、流產(chǎn)、木乃伊胎、先天畸形,產(chǎn)出免疫耐受的持續(xù)感染帶毒?;蛘5娜跣∨?。
從間隔4周連續(xù)采集的兩份黃牛血樣中成功分離出不引起細(xì)胞病變的病毒,表明持續(xù)感染牛可連續(xù)地向環(huán)境中排毒并引起其他牛的急性感染。持續(xù)感染牛中無(wú)特異性抗體或抗體水平低。通過(guò)把病毒傳給子代,可形成持續(xù)性感染牛群。偶爾,一頭持續(xù)感染牛可重復(fù)感染可引起細(xì)胞病變的BVDV,引起以口腔和胃腸粘膜壞死為特征的致死性粘膜病。這些牛表現(xiàn)為病毒陽(yáng)性但卻沒(méi)有抗體。具體文獻(xiàn)見(1)和(2)。
本試劑盒具有很高的敏感性和特異性。分別用500份病毒中和試驗(yàn)陽(yáng)性血清和500份病毒中和試驗(yàn)陰性血清進(jìn)行試驗(yàn),敏感性和特異性達(dá)到98%和99%。
二、參考文獻(xiàn)
(1) Baker JC. Bovine viral diarrhea virus: A review. J. Am. Vet. Med. Assoc. 190, 1449 -1458, 1987.
(2) Deregt D and Loewen KG. Bovine viral diarrhea virus: Biotypes and disease. Can. Vet. J., 36, 371 - 378, 1995.
(3) Kramps JA, Van Maanen C, Van de Wetering G, Stienstra G, Quak S, Brinkhof J, Ronsholt L, Nylin B. A simple, rapid and reliable enzyme-linked immunosorbent assay for the detection of bovine virus diarrhoea virus (BVDV) specific antibodies in cattle serum, plasma and bulk milk. Vet Microbiol Jan. 64 (2-3), 135 - 144, 1999
(4) Paton DJ, Ibata G, Edwards S and Wensvoort G. An ELISA detecting antibodies to conserved pestivirus epitopes. J. Vir. Meth., 31, 315 - 324, 1991.
(5) Edwards S, Sands JJ and Harkness JW. The application of monoclonal antibody panels to characterize pestivirus isolates from ruminants in Great Britain. Arch. Virol. 102, 197 -206, 1988.
三、應(yīng)用
本試劑盒可檢測(cè)牛血清、血漿、牛奶中不同亞型(la、lb、ll)的牛病毒性腹瀉病毒抗體,用于在個(gè)體或群體水平上診斷牛病毒性腹瀉病毒感染。通過(guò)測(cè)定雙份血清(至少間隔4周)的滴度來(lái)監(jiān)控個(gè)體動(dòng)物的感染狀態(tài)。
此外,本試劑盒是大規(guī)模篩選和*計(jì)劃中有價(jià)值的工具。Ceditest? BVDV和Ceditest? BVDV-Ag的聯(lián)合使用可追蹤大量排毒且一般沒(méi)有抗體或滴度很低的持續(xù)感染動(dòng)物。
然而,BVDV持續(xù)性感染的確診必須通過(guò)病毒分離試驗(yàn)和/或BVDV抗原檢測(cè)(Ceditest? BVDV-Ag)進(jìn)行。為了排除免疫系統(tǒng)完善動(dòng)物的短暫感染,應(yīng)該4周后重復(fù)檢測(cè)。
另外,本試劑盒還可以用來(lái)確定綿羊和豬的血清中的BVDV特異性抗體。