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技術文章

Hoechst 33258 染色液(1mg/ml) 產品簡介

點擊次數:2790 發布時間:2016-3-30

Hoechst 33258 染色液(1mg/ml)

產品簡介:

Hoechst 33258 也稱 bisBenzimide H 33258HOE 33258,分子式為 C25H24N6O 3HCl,分子量為533.88CAS Number 23491-45-4。Hoechst 33258 是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料,對細胞的毒性較低,常用于細胞凋亡檢測,染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。Hoechst 33258也用于普通的細胞核染色、DNA染色。

Hoechst 33258的zui大激發波長為346nm,zui大發射波長為460nm,Hoechst 33258和雙鏈DNA結合后,zui大激發波長為352nm,zui大發射波長為461nm。NobleRyder Hoechst 33258染色液是濃縮的儲存液,稀釋后使用,一般推薦工作濃度為15μg/ml,用于固定細胞或組織的細胞核染色。

產品組成

編號

名稱

D0811

Storage

Hoechst 33258染色液(1mg/ml)

1ml

-20℃避光

使用說明書

1

 

自備材料:

1、熒光顯微鏡

2、蒸餾水

3、微量秱液器

4PBS 或生理鹽水

 

操作步驟(僅供參考)

()固定的組織細胞染色

1、根據實驗具體要求,用無菌去離子水秲釋到自己所需濃度,即為Hoechst 33258染色工作液。細胞核染色時,一般推薦工作濃度為15μ g/ml。

2、于細胞或組織樣品,固定后沖洗去除固定劑。如果需要進行免疫熒光染色,則*行免疫熒光染色,染色完畢后再按后續步驟進行Hoechst 33258染色,如果不需要進行其它染色,則直接進行后續的Hoechst 33258染色。對于貼壁細胞或組織切片,加入少量Hoechst 33258染色液,覆蓋住樣品即可。對于懸浮細胞,少加入待染色樣品3倍體積以上的Hoechst 33258染色液,充分混勻。

3、室溫放置 58min。

4、輕輕吸除Hoechst 33258染色液。

5、用無菌的 PBS 或生理鹽水清洗23次,每次35min

6、直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。

()活細胞染色

1、據實驗具體要求,用無菌去離子水稀釋到自己所需濃度,即為Hoechst 33258染色工作液。細胞核染色時,一般推薦工作濃度為15μg/ml。

2、取96246孔板培養細胞至合適狀態,按96孔板加入100μl、24孔板加入500μl6孔板加入1ml的比例,加入適當的Hoechst 33258染色液,染液必須充分覆蓋細胞。

3、在適宜于細胞培養的條件下培養2030min

4、輕輕吸除Hoechst 33258染色液。

5、用無菌的 PBS 或生理鹽水清洗 23 次,每次 35min。

6、進行熒光檢測。

 

注意事項:

1、NobleRyder Hoechst 33258染色液(1mg/ml)應稀釋至合適的濃度后使用。

2、熒光染料都存在淬滅的問題,建議染色后盡快檢測?;罴毎蚪M織染色后宜立即觀察。

3、為減緩熒光淬滅,可以使用抗熒光淬滅封片液。

4、避免反復凍融,否則容易失效。

5、Hoechst33342對人體有一定刺激性,請注意適當防護。

6、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

 

有效期:12個月有效。

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