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RWPE-1細胞株RWPE-1細胞價格

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品       牌:ATCC

廠商性質:生產商

所  在  地:上海市

更新時間:2024-08-13 10:55:44瀏覽次數:1655

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細胞介紹:RWPE-1細胞為人正常前列腺上皮細胞,來源于人正常前列腺,中文名為人正常前列腺上皮細胞,正常的細胞形態為上皮樣,貼壁生長。腫瘤抑制基因: p53 + [PubMed: 9214605] pRB + [PubMed: 9214605] 一位正常男性前列腺組織切片的周圍區域的上皮細胞用單拷貝的人乳頭瘤病毒的18(HPV-18)進行轉化,建立了RWPE-1 (ATCC CRL-11609) 細胞株 [PubMed: 9214605]. 在三維Matrigel培養時,在雄激素作用下,RWPE-1細胞形成腺胞并向培養基中分泌PSA。[PubMed: 11170142]. 當與Matrigel或基質細胞混合注射雄性裸鼠時,RWPE。

培養基:這株細胞的基本培養基作為Invitrogen (GIBCO)提供的kit的部分: 角化細胞無血清培養基K-SFM,kit目錄號17005-042。隨kit提供這株細胞生長所需的兩種添加劑(牛垂體提取物BPE及人重組表皮生長因子EGF)。 配制*生長培養基,需添加以下成分: 0.05 mg/ml BPE – 隨K-SFM提供 5 ng/ml EGF -隨K-SFM提供。K-SFM,BPE 0.05mg/ml,EGF 5ng/ml(Gibco試劑盒17005-042)。

培養條件:37℃ 5% CO2

消化條件:洗滌:不含Ca++/Mg++離子的D-PBS;消化:溶于D-PBS的0.05% (w/v) Trypsin-0.53mM EDTA溶液,消化5-10min,不能拍打培養皿, 需要靜止自然消化;中和:0.1% 大豆胰蛋白酶抑制子或含2%FBS的D-PBS;離心125×g, 5~7min

傳化比例:1:3-1:5

換液時間:2天換液一次

凍存液比例:85%培養基,10%FBS, 10% (v/v) DMSO

凍存密度:1-3 ×10^6/管,液氮保存

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慧穎運輸:短途運輸問題不大。可是長途天熱時,我們要做好相應的運輸安全措施。活細胞的運輸方法相對比較簡單,a)將該瓶細胞裝滿培養基,這樣做的目的是讓所有細胞都始終有營養供給。b)用酒精擦拭培養瓶,瓶口用封口膜包好。c)細胞取回后,半量換液。冬天則是采用全血清包被細胞運輸,細胞運輸中處于休眠狀態,收到細胞以后,用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超菌臺內,嚴格無菌操作;然后將小管細胞轉移至T25培養瓶,加入5ml左右含FBS的培養基混勻,放入培養箱隔夜培養后查看細胞匯合度:若未超過80%匯合度,換液繼續培養,根據情況傳代或者凍存。若超過80%匯合度,可直接進行傳代。

對于RWPE-1細胞株RWPE-1細胞價格貼壁細胞應先吸(倒)盡培養基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養瓶內,加入*培養基后繼續培養或實驗。

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