大家都知道,細胞不斷地向細胞外空間分泌各種囊泡、大分子及小分子。至于分泌哪種類型的囊泡,這要看心情,哦不,要看細胞的來源以及它們目前的狀態。近年來,一種微型的囊泡正受到越來越多的關注,這就是exosomes,又稱外泌體。了解更多慧穎生物無外泌體血清Exosome-free FBS。
這種直徑在30至150 nm的小囊泡天然存在于各種體液中,包括血液、唾液、尿液以及母乳。它們像一輛輛小卡車,攜帶了精心安排的RNA和蛋白貨物,在許多生物過程中發揮了不同的作用和功能,比如抗原呈遞、程序性細胞死亡、血管生成和炎癥等。
其實,在過去很長一段時間內,exosomes一直坐在冷板凳上。人們認為,那些貨物不過是些垃圾袋而已。幾年前,人們才意識到,exosomes實際上擔當了真核細胞之間的通訊作用。核酸是帶電荷的分子,無法穿過細胞膜,于是這些囊泡為改變細胞的轉錄組助下一臂之力。
通俗地說,exosomes就像病毒一樣,將內源的遺傳物質從一個細胞傳遞到另一個細胞。以microRNA miR-451為例,腫瘤*地釋放miR-451,并將其裝入囊泡。當周圍的細胞獲得這些囊泡,它們就收到了一堆轉錄本,使得細胞狀態更有利于腫瘤生長和血管生成,從而促進了腫瘤的發展。而這僅僅是一個分子。從整體上看,細胞中也有一個社交網絡。它們不斷交換囊泡,交流大量的信息。
至于細胞間交流了什么,這也是研究人員感興趣的地方。他們認為,exosomes有望作為生物標志物,用于疾病的診斷和治療。在此方面,exosomes又格外有吸引力,因為外界的核酸酶和蛋白酶無法破壞它的貨物,囊泡內的大分子在一段時間內是穩定的。
當然,我們需要工具,來研究exosomes。幾年前,這方面的工具還相當少。隨著exosomes研究熱潮的涌現,如今我們的選擇也越來越多了
分離exosomes
對于許多研究而言,我們首先要分離出exosomes。經典的方法是超速離心。具體操作是,首先以相對低的速度沉淀樣品,去除細胞碎片,然后逐步提高速度,zui終以100,000 x g離心1.5小時,以沉淀exosomes。不過,這種方法耗時耗力,也很難標準化,因為各個實驗室的轉子不同,離心條件不同。這就使得實驗室之間的結果幾乎沒辦法比較。而且,并非每個實驗室都能用上超速離心機。
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