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上海慧穎生物科技有限公司

RAW264.7 RAW264.7細胞形態RAW264.7

時間:2019-7-6閱讀:5859

RAW264.7 RAW264.7細胞形態RAW264.7

慧穎生物出售RAW264.7細胞形態圖

RAW264.7 RAW264.7細胞形態RAW264.7 操作說明書:

細胞名稱

Raw264.7小鼠單核巨噬細胞白血病細胞

貨號

M003

種屬

小鼠

細胞來源

ATCC/中科院/協和醫院等地引進

生長特性

貼壁 單核細胞樣

培養條件

培養基:90% DMEM  +10% FBS(推薦HAKATA優等胎牛血清 貨號:HN-FBS-50)

溫度:37℃     氣相:95%空氣,5%二氧化碳

傳代

1.75%酒精噴灑整個培養瓶消毒,將其平躺置于培養箱中進行1-3小時的緩沖,.然后置于無菌操作臺,打開瓶口,將其中的培養液去掉,再往其中加入5-6mL新鮮培養基并置于細胞培養箱中培養,根據細胞生長狀況及培養基顏色變化對其進行換液以及傳代;

2.待細胞長滿瓶底面積70%,已有部分細胞開始堆疊時,需要對其進行傳代,傳代比例為1:316

3傳代步驟:去掉舊培養基后,使用細胞刮將細胞刮下,再加入培養基重懸傳代。或去掉舊培養基后,加入冷PBS或培養基對細胞進行吹打將其從瓶底分離。吹打次數不宜過多,以免造成細胞損傷。若懸浮細胞較多,可直接用舊培養基吹打細胞,吹打完成后吸出培養基,1000r/min離心5min,去上清后加入新鮮培養基重懸傳代。

保存

凍存條件:80%*培養基+10%FBS+10%DMSO

(備注:建議使用本公司的冷凍液(H-W-100),4度保存的冷凍液直接重懸細胞,不能預熱后使用。)

保存條件:液氮存儲

供應限制

僅供研究之用

常見問題及解決方案

1.培養瓶有破裂,培養液有漏液:細胞極大可能會污染,所以我們會及時安排幫老師解決。

2.收到細胞后盡快更換為含 10%血清的新鮮培養基,如因特殊情況需要繼續使用原瓶培養基,請在原瓶培養基中額外添加 10%的血清(原瓶培養基的繼續使用時間長不宜超過 72 小時)

3.細胞漂浮:培養瓶不開封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養箱。1-2小時后觀察,如細胞大部分又貼回瓶底,表明細胞活力正常,剩余漂浮的細胞可以去掉,留8-10ml培養液培養觀察,細胞生長至匯合度80%,進行消化傳代;如細胞還是不貼壁,將細胞離心收集轉到新培養瓶,原培養瓶加部分培養液繼續培養,中間注意觀察,我們的技術人員會一直跟蹤指導,直到問題解決。

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