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OCI-LY18細胞株復蘇失敗原因分析
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產品名稱:OCI-LY18細胞
中文名稱:人急性髓系白血病細胞
種屬:人
來源:急性髓系白血病;女性
培養條件:IMDM
生長狀態:懸浮
OCI-LY18細胞株復蘇失敗原因分析
其他細胞培養用液
在細胞培養過程中,除了培養基外,還經常用到一些平衡鹽溶液、消化液、pH調整液等。
一、平衡鹽溶液(balanced salt solution,BSS):主要是由無機鹽、葡萄糖組成,它的作用是維持細胞滲透壓平衡,保持pH穩定及提供簡單的營養。主要用于取材時組織塊的漂洗、細胞的漂洗、配制其他試劑等。zui簡單的BSS是Ringer。D-Hank's與Hank's的一個主要區別是前者不含有Ca2+、Mg2+,因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。Earle平衡液含有較高的NaHCO3(2.2g/L),適合于5%CO2 的培養條件,Hank's平衡液僅含有0.35g/L NaHCO3,不能用于5%CO2的環境,若放入CO2培養相,溶液將迅速變酸,使用時應注意。
配制溶液應使用雙蒸水或去離子水。如果配方中含有Ca2+、Mg2+,應當首先溶解這些成分。配好的平衡鹽溶液可以過濾除菌或高溫滅菌。
OCI-LY18細胞株復蘇失敗原因分析
HRMC 人腎系膜細胞 人 腎;系膜細胞 DMEM 貼壁
hREC 人視網膜內皮細胞 人 視網膜;內皮細胞 DMEM 貼壁
HOCF 人脈絡膜成纖維細胞 人 脈絡膜;成纖維細胞 DMDM 貼壁
QBI-293A 腺病毒包裝人胚腎細胞 人 胚腎;腺病毒包裝 DMDM 貼壁
OVHM 小鼠卵巢癌細胞 小鼠 卵巢癌 1640 貼壁
WEHI-3B 小鼠髓樣單核白血病細胞 小鼠 白血病;BALB/c 1640 懸浮
SGC7901 人低分化胃癌細胞 人 胃癌;女性 1640 貼壁
HSC-2 人口底癌細胞 人 口腔鱗癌;男性 DMEM 貼壁
HRCEC 人視網膜微血管內皮細胞 人 視網膜微血管;內皮細胞 DMEM 貼壁
RBMVEC 大鼠腦微血管內皮細胞 人 腦微血管;內皮細胞 1640 貼壁
TE-13 人食管癌細胞 人 食管鱗癌;男性 DMEM 貼壁
HPAC 人胰腺癌細胞 人 胰腺癌;女性 1640 貼壁
HS766T 人胰腺癌細胞 人 胰腺癌;淋巴結轉移;男性 1640 貼壁
HVSMC 人血管平滑肌細胞 人 血管平滑肌 DMEM 貼壁
BT20 人乳腺癌細胞 人 乳腺導管癌;女性 EMEM/1640 貼壁
A101D 人黑色素瘤細胞 人 黑色素瘤;男性 DMEM 貼壁
SF126 人膠質母細胞瘤細胞 人 膠質母細胞瘤;女性 DMEM 貼壁
CAL62 人甲狀腺癌細胞 人 未分化甲狀腺癌;女性 DMEM 貼壁
UMUC3 人膀胱癌細胞 人 膀胱癌;男性 1640 貼壁
A673 人橫紋肌瘤細胞 人 尤因肉瘤;女性 DMEM 貼壁
C518 大鼠膝關節退變軟骨細胞 大鼠 膝關節退變軟骨細胞 EMEM 貼壁
RS1 大鼠皮膚成纖維樣細胞 大鼠 皮膚;成纖維樣細胞 DMEM 貼壁
Bcap-37 人乳腺癌細胞 人 乳腺癌;女性 1640 貼壁
SPC-A-1 人肺腺癌細胞 人 肺腺癌 1640 貼壁
RAEC 大鼠主動脈血管內皮細胞 大鼠 主動脈;血管內皮細胞 1640 貼壁
SF767 人腦瘤細胞 人 腦瘤;女性 DMEM 貼壁
RSC-364 大鼠滑膜細胞 大鼠 滑膜細胞 DMEM 貼壁
CRFK 貓腎細胞 貓 腎;自發永生;女性 1640 貼壁
NB-4 人急性早幼粒白血病細胞 人 急性早幼粒細胞白血病;女性 1640 懸浮
ME-1 人類急性髓系白血病細胞 人 急性髓系白血病;男性 IMDM 懸浮
MKN45 人低分化胃癌細胞 人 胃癌;肝轉移;女性 1640 貼壁
CESS 人急性髓系白血病細胞 人 急性髓系白血病;男性 IMDM 懸浮
J-111 人單核細胞白血病細胞 人 單核細胞白血病 1640 懸浮
OCI-AML2 人急性髓系白血病細胞 人 急性髓系白血病;男性 IMDM 懸浮
NKM-1 人白血病細胞 人 急性髓系白血病;男性 1640 懸浮
NCI-H23 人非小細胞肺癌細胞 人 肺腺癌;男性 1640 貼壁
ROS17/2.8 大鼠成骨細胞 大鼠 骨肉瘤;ACI 9935 DMEM/F12 貼壁
GL261 小鼠膠質瘤細胞 小鼠 膠質瘤;C57BL/6 DMEM 貼壁
RCS 大鼠軟骨肉瘤細胞 大鼠 軟骨肉瘤;SD EMEM 貼壁
RL 人彌漫大B淋巴瘤細胞 人 彌漫大B淋巴瘤;男性 1640 懸浮
DCS 人樹突狀細胞 人 樹突狀細胞 DMEM 貼壁消化液:取材進行原代培養時常常需要將組織塊消化解離形成細胞懸液,傳代培養時也需要將貼壁細胞從瓶壁上消化下來,常用的消化液有胰酶(Trypsin)溶液和EDTA溶液,有時也用膠原酶(collagenase)溶液。
1、胰酶溶液:胰酶活性可用消化酪蛋白的能力表示,常見有1:125和1:250,即一份胰酶可消化125或250份酪蛋白。組織培養用胰酶溶液一般配制成0.1-0.25%濃度,配制時要用不含Ca2+ 、Mg2+及血清的平衡鹽溶液(如前面的D-Hank's),因為這些物質會對胰酶產生抑制作用。胰酶作用及溶解的*pH是8-9,配制胰酶溶液應將液體調至pH8左右,充分溶解,過濾除菌。過濾后可以再調只pH7.5,也可不調。
使用細胞清洗液配制胰酶消化液:含0.5%胰酶的細胞清洗液(100ml細胞清洗液加0.5g胰酶),過濾除菌,分裝于4度保存。
2、EDTA溶液:EDTA溶液也常用來解離細胞,它的作用機制是破壞細胞間的連接。對于一些貼壁特別牢固的細胞,還可以用EDTA和胰酶的混合液進行消化。EDTA溶液的使用濃度為0.02%,配制時應加堿助溶,配制后可過濾除菌,也可高溫消毒滅菌。
3、膠原酶溶液:膠原酶在上皮類細胞原代培養時經常使用,膠原酶作用的對象是膠原組織,因此不容易對細胞產生損傷。膠原酶的使用濃度為0.1-0.3mg/L或200000U/L,作用的*pH為6.5。膠原酶不受Ca2+ 、Mg2+及血清的抑制,配制時可用PBS。
OCI-LY18細胞株復蘇失敗原因分析
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