震撼市場的細胞篩網結構先進
細胞篩網為獲得單細胞懸液的工具,與50ml離心管配套使用,分散細胞團塊或原代組織,研究方向為流式細胞,微載體與細胞分離、過濾細胞,三種網孔徑配合不同類型的樣品使用不同的顏色可區別不同的孔徑型號,單獨包裝,γ射線滅菌,根據不同細胞培養的需要選擇。
細胞篩網所有組織培養處理都是使聚苯乙烯具有親水性,且包含各種支持細胞培養的帶負電的官能團。所有組織培養處理都在一真空室中進行*的氣溶膠組織培養表面處理,保證細胞良好黏附、鋪展和生長,導入了一系列正電荷含氮集團,以培養更多不同類型的細胞,某些特殊尤其是眾多的干細胞或細胞系細胞的貼壁和鋪展 疏水性更強,能降低細胞貼壁。細胞篩網用吸管將稀釋的血液沿離心管壁徐徐加到分離液面上,用力要輕,避免血液沖入分離液中,使得稀釋血重疊在分離液面以上,擰緊管蓋。稀釋血與分離液的高度比在1:2-2:1之間。原則上兩者的總高度不超過離心管的2/3。
將離心管放置于水平離心機中,室溫下 2000rpm離心20min。離心過程中要觀察離心速度是否正確,且在停止時選擇“no break”,避免因為急劇減速將已經分離的單個核細胞層重新弄混。注意離心結束時的減速過程,不要太快。離心結束后可見管內分為四層,細胞篩網從上至下分別為:血漿層(含部分血小板)、白膜層(含單個核細胞及少量血小板)、分離液層、粒細胞及紅細胞層。將吸管輕輕穿過血漿層至白膜層,沿離心管周緣吸出血漿層與分離液層界面間的細胞篩網,置于新離心管中。盡量少吸取分離液。細胞篩網加吸出體積5倍以上液體,用吸管吹打均勻,避免產生氣泡,液拄高度不要超過離心管的2/3。室溫1500rpm離心10min,快速傾倒出上清液。
細胞篩網注意吹打均勻,不要有細胞團塊。室溫下1500rpm離心5min,洗滌兩次。zui后一次洗滌時定量加入RPMI1640,吹打均勻后取樣計數細胞,zui后一次離心完畢傾倒出上清液后請請要度離心管,將管底細胞搖勻。根據上一步的計數結果,用含FBS10%-20%、雙抗的RPMI1640培養液將細胞配成所需濃度。離心速度太慢或時間不足時,淋巴細胞層較薄,且在這個層面上有紅細胞混雜;離心速度太快或時間過長時,淋巴細胞層相對分散,會進入下面的分離液層,每次將離心管帶入超凈臺內時要用酒精擦拭細胞篩網,尤其管口和管帽。