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通用型細胞分離液操作說明和使用保存中的注意事項:(各種動物)
本品為帶有乳光或微乳光的滅菌水溶液。主要成分是葡聚糖與泛影酸葡甲胺。適用于從血液
及組織勻漿中(小牛血清懸起勻漿的細胞 1X107/ml)分離所需細胞,在醫療和醫學生物中廣泛
應用。
其他人及動物多種比重細胞分離液。注:因不同種屬不同比重分離液的細胞離散系數及細胞
帶電不同,所以用戶在定制分離液時應提供所需分離液的比重、動物的種屬及被分離細胞的名稱。
使用方法
例:取新鮮抗凝血1ml,與Hank’s 液1:1 混勻后,小心加于2ml 的細胞分離液之液面上,以1500
轉/分離心(半徑15cm 水平轉子)1 分鐘,注:調整離心速度和時間,以下細胞分層可為不同細胞
分層,收集所需細胞層即可,離心管中由上至下細胞分四層。*層;為血漿或組織勻漿液層。
第二層;為環狀乳白色細胞層。第三層;為透明分離液層。第四層;為紅細胞層(此紅細胞層,
表面有懸起的部分白細胞層收集此層細胞即為白細胞。收集第二層的細胞(粒細胞和單核細胞),
放入含 Hank’s 液15 毫升的試管中,充分混勻后,以1500-2000 轉/分離心10 分鐘。吸去上清液,
沉淀經反復洗2 次。用Hank’s 液或小牛血清重新懸起沉淀的細胞(1X107/ml)用相應動物的單
核細胞分離液去除或收集單核細胞備用。(參照淋巴細胞和單核細胞分離方法)其余即為粒細胞,
收集備用。
注意事項
1. 啟封后應置4℃保存避免微生物的污染。 2. 細胞分離液從冰箱取出后,不可立即使用,需待
溶液溫度升至室溫時,搖勻后使用。 3. 整個分離過程中,溫度應控制在18-28℃且在無菌環境
下,避免微生物的污染,否則會影響分離質量。
應 用
-從動物血液及組織中分離淋巴細胞
特點
-密度變化率依照Ficoll 400,泛影酸和氫氧化鈉. -*分離溶液的密度為參照具體產品的標簽
-生理學參數-在低粘度時高密度-無菌-即用型-溶液
產品規格
溶液 水
PH 7.0-7.5
滲透壓 280-340mOsmol/kg
內毒素 <5EU/ml
無菌 已檢測
保存期限 2 年
貯藏 +18℃-+25℃
注 意
TBD 實驗室的細胞分離培養基是敏光型的。這種培養基在運輸和貯藏過程中應避光保溫。由于
各品牌離心機的性能不同,國內南北地區溫度環境和四季的差異,可能影響分離效果,用戶可以
調節離心轉數,調節離心的時間,摸索*的分離條件(具體分離條件各實驗室自定)。組織,
血液,細胞要求新鮮,避免冷凍和冷藏。
貯 藏
18-25℃避光保存。啟封后置4℃保存。本品為真空包裝,未啟封前置于10℃ 以下易出現白色結
晶,影響分離效果。
通用型細胞分離液的比重調整:
制備幾種不同的細胞分層液:40%、42.5%、45%、47.5% 、50%、52.5%、55%、57.5% 、60%、
62.5% 、65%、67.5%、70%、75%、80%
(0.1mol PBS PH:7.2 稀釋配制)
40% LTS113分離液比重約為 : 1.0550
42.5% LTS113分離液比重約為 : 1.0580
45% LTS113分離液比重約為 : 1.0610
47.5% LTS113分離液比重約為 : 1.0650
50% LTS113分離液比重約為 : 1.0670
52.5% LTS113分離液比重約為 : 1.0700
55% LTS113分離液比重約為 : 1.0730
57.5% LTS113分離液比重約為 : 1.0760
60% LTS113分離液比重約為 : 1.0780
62.5% LTS113分離液比重約為 : 1.0800
65% LTS113分離液比重約為: 1.0830
67.5% LTS113分離液比重約為: 1.0850
70% LTS113分離液比重約為 : 1.0875
75% LTS113分離液比重約為 : 1.0920
80% LTS113分離液比重約為 : 1.1000
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