分離方法說明及圖例
A．取 1ml新鮮抗凝血與E液1：1混合再與1ml的全血及組織稀釋液（Cat#：2010C1119）混
勻置20℃-30℃下自然沉降20-30分鐘。吸取渾濁的上清部分，底部紅細(xì)胞（含大量中性
粒細(xì)胞）備用；
B．將步驟A中所得的渾濁上清液體小心疊加在A液之液面上（上清液與A液的比例為1：1）；
C．以400g（約1500轉(zhuǎn)/分）離心15分鐘（半徑15cm水平轉(zhuǎn)子）；
此時(shí)離心管中由上至下細(xì)胞分四層。*層;為稀釋液（血漿）層。第二層；為環(huán)狀
乳白色單個(gè)核細(xì)胞層。第三層；為混濁分離液層（此層液體中含有一定量中性粒細(xì)胞）。
第四層；極少量紅細(xì)胞層（含一定量中性粒細(xì)胞）。
D．將步驟A及步驟C中所得紅細(xì)胞層用紅細(xì)胞裂解液裂解并去除紅細(xì)胞獲得大量中性粒細(xì)
胞（詳細(xì)方法請(qǐng)參看“二、紅細(xì)胞裂解液使用說明”）。
E. 收集步驟C中所得第三層混濁分離液及步驟D中所得大量中性粒細(xì)胞放入含細(xì)胞洗滌液
（Cat#：2010X1118）4-5ml的試管中，充分混勻后，以500g（約1800轉(zhuǎn)/分）離心20分鐘，
棄去上清留沉淀細(xì)胞重新懸起。重復(fù)洗滌2次即得所需中性粒細(xì)胞。

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人或各種動(dòng)物外周血中性粒細(xì)胞分離液試劑盒分離方法說明及圖例

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