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LSM® is a sterile filtered solution which contains 6.2g Ficoll and 9.4 g sodium diatrizoate per 100 ml. The density is 1.0770-1.0800 g/ml at 200C.
LSM® 是一種滅菌過濾溶液,每100毫升包含6.2克聚蔗糖和9.4克鈉胺。密度是1.0770-1.0800克/毫升20℃。
使用說明:
以下的操作步驟是zui初由Böyum.設計的程序的眾多改良版本中的一種。此程序的改良是通過運用除去血液中的纖維蛋白或抗凝血劑處理人體血液;這種改良對于其他物種來源血液或者其他組織非常有必要。
2. 無菌轉移3 mlLSM到15 ml離心管中。
3. 混合2 ml除纖維蛋白血液或肝素處理血液和2 ml 生理鹽水
4. 仔細的將稀釋血液加入3 mlLSM(室溫)于15ml離心管中,在血液和LSM中形成一個明顯的分層。不要將稀釋血液混合入LSM中。
5. 室溫下400g離心15-30分鐘,離心可以沉淀紅細胞和多核白細胞同時可以再LSM上形成一層單核淋巴細胞,如上圖所示。
6. 吸出淋巴細胞上方2-3mm的血漿。
7. 吸取淋巴細胞層以及它下面一半的LSM和轉移到另外的一個離心管。加入等體積的平衡鹽緩沖液至淋巴細胞離心管中,室溫離心10分鐘,離心速度設定在既不損傷細胞又能沉淀細胞即刻,例如160 - 260 x g(去除LSM和降低血小板的百分比)。 8. 用平衡鹽緩沖液清洗細胞,用適當的培養基重懸細胞。 訂購信息:相當于sigma公司的Histopaque®-1077產品 名稱 貨號 規格 單價 * 淋巴細胞分離液(MPbio公司產品) 660元 350元 1549元 1300元 相當于sigma公司的Histopaque®-1077產品 也相當于GE公司的Ficoll-Paque PREMIUM
廠家說明
MP Biomedicals生物醫學公司是位于美國加利福尼亞州的生命科學和生物技術廠商。2004年底成功收購Qbiogene、ICN,現在有5個大型倉庫,能夠及時供應各行業需求,亞洲倉庫位于新加坡。它致力于生命科學領域的基礎研究和探索。目前它提供55000多種產品,是世界上能全面提供生命科學產品和臨床診斷產品的幾家廠商之一。
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