北京西美杰科技有限公司
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更新時間:2017-07-20 05:16:34瀏覽次數(shù):2184
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AP標(biāo)記蛋白/抗體試劑盒—SureLINK™ AP Conjugation Kit
堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,AP)是一種普遍存在的二聚金屬酶類,由Suzuki等在1907年首先發(fā)現(xiàn)的。生理作用是非特異性水解磷酸單酯鍵,分子量大小為120kDa,zui適pH值為8.6-10.3,因此稱為堿性磷酸酶。AP廣泛運(yùn)用于酶聯(lián)(ELISA)、Western Bloting以及免疫組化技術(shù)等,作為多個試劑盒顯色體系的關(guān)鍵成分,對試劑盒的質(zhì)量有重要影響。堿性磷酸酶比活性高,穩(wěn)定,所以經(jīng)常被用于抗體或其他蛋白質(zhì)的標(biāo)記,而不會影響偶聯(lián)蛋白的活性和功能。
戊二醛由于具有較低的價格和較高的活性,已成為zui常用的用于AP偶聯(lián)的交聯(lián)試劑。這種使用戊二醛的AP偶聯(lián)標(biāo)記方法已經(jīng)被廣泛認(rèn)可,但是也存在一定的缺陷,比如在標(biāo)記時對戊二醛和抗體間的比率非常敏感,不合適的配比可能會導(dǎo)致較低的溶解性和酶活力;同時在標(biāo)記過程中,也很難避免不同活力的混合物出現(xiàn),因此在偶聯(lián)時,待偶聯(lián)反應(yīng)發(fā)生后需要進(jìn)行淬滅,純化并去除多余的交聯(lián)物;另外,對于待偶聯(lián)物不同的制備來源和分子量大小,都會對zui終的交聯(lián)反應(yīng)產(chǎn)生較大的影響。馬來酰亞胺(maleimide)也被用于交聯(lián)反應(yīng),其糖基部分可以與巰基反應(yīng)以形成穩(wěn)定的偶聯(lián)物,但是需要提前對偶聯(lián)抗體或蛋白進(jìn)行二硫鍵還原處理。
SureLINK AP Conjugation Kits AP偶聯(lián)標(biāo)記試劑盒內(nèi)提供了一個比上述方法更優(yōu)秀更快捷的AP偶聯(lián)方案。其原理是采用雙偶聯(lián)的技術(shù)分別對AP和抗體進(jìn)行交聯(lián),如左上圖所示。琥珀酰亞胺-4-苯甲酸甲酯Succinimidyl-4-Formyl Benzoate (SFB)的醛基與抗體蛋白結(jié)合,同時Succinimidyl 6-hydrazinonicotinate Acetone Hydrazone(SANH)的肼基偶聯(lián)上AP,這樣通過醛基與肼基之間形成穩(wěn)定的腙鍵而實現(xiàn)抗體蛋白與AP的偶聯(lián)。
作為即用型的組分,SureLINK™AP偶聯(lián)蛋白/抗體試劑盒能在90分鐘制備完成標(biāo)記HRP的抗體或蛋白。制備好的AP標(biāo)記的抗體或蛋白能在4℃穩(wěn)定保存至少半年。試劑盒內(nèi)包括SureLINK Modified AP(干粉)、AP激活及偶聯(lián)緩沖液、SFB以及AP儲存緩沖液。每毫克經(jīng)SFB修飾的AP可結(jié)合0.1-0.5mg抗體或蛋白,特別適合于AP單克隆抗體的制備。經(jīng)SureLINK AP Conjugation Kits 偶聯(lián)試劑盒標(biāo)記的抗體,結(jié)合相應(yīng)的顯色或化學(xué)發(fā)光底物,可應(yīng)用于ELISA、WB及免疫組化等方法的免疫學(xué)檢測及定量分析。
SureLINK™ AP標(biāo)記抗體/蛋白試劑盒具有以下優(yōu)點(diǎn):
- 方便快速:兩步反應(yīng)(見右),近三個小時(20分鐘手動工作)就可以完成整個交聯(lián)反應(yīng);
- 活性強(qiáng):可以標(biāo)記從0.05mg到1.5mg范圍的抗體(蛋白);
- 通用性:可以用于下游各種免疫檢測實驗,比如ELISA, Western blotting和免疫組化
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 產(chǎn)品說明(點(diǎn)擊查看說明書) |
SureLINK AP Conjugation Kit | 85-00-01 | 3 x 0.1 mg rxn. |
85-00-02 | 5 x 0.5 mg rxn. | |
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 產(chǎn)品說明(點(diǎn)擊查看說明書) |
SureLINK Modified AP | 85-01-01 | 0.2mg包裝 |
85-01-02 | 1.0mg包裝 |
除了完整的AP標(biāo)記抗體/蛋白試劑盒,還有單獨(dú)組分的SureLINK Modified AP(干粉狀的激活A(yù)P)提供。
作為美國zui早實現(xiàn)親和素純化二抗商業(yè)化的生物公司,同時也是世界上zui大的二抗和底物顯色系統(tǒng)的生產(chǎn)商。 KPL一直提供高質(zhì)量的用于分子生物學(xué)、免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)和體外診斷試劑及用于蛋白和核酸檢測的試劑盒。針對于蛋白標(biāo)記以及蛋白偶聯(lián),KPL有HRP及AP標(biāo)記及偶聯(lián)試劑盒,還有專門用于兩個蛋白質(zhì)之間的偶聯(lián)試劑盒提供。另外還有多種化學(xué)發(fā)光和顯色底物及相關(guān)產(chǎn)品,以及全系列針對不同種屬的各種標(biāo)記的現(xiàn)貨二抗。如果您對KPL的產(chǎn)品感興趣,請致電/9569 /8795/4237到西美杰科技有限公司免費(fèi)索取相關(guān)產(chǎn)品資料,或者問詢您所感興趣的產(chǎn)品類型。