本測試盒用間接競爭免疫分析法定量測定谷物中AFB1。該測試盒反應(yīng)孔可拆卸，可測單份樣品，也可測多份樣品。定量分析時(shí)需有含450nm波長的微孔板酶標(biāo)儀。

1 概要

黃曲霉毒素是由曲霉菌屬的黃曲霉和寄生曲霉等產(chǎn)生的次級代謝產(chǎn)物，主要污染玉米、花生、堅(jiān)果等。天然污染的黃曲霉毒素以AFB1為主，AFB1具有*的急性毒性和致癌性，肝臟是其主要的靶器官。

AFB1檢測方法主要有薄層色譜法（TLC）、高效液相色譜法（HPLC）和ELISA方法，本試劑盒是以應(yīng)用單克隆抗體為基礎(chǔ)的ELISA檢測方法，可以準(zhǔn)確快速檢測糧谷類、花生及飼料中的AFB1。

2 測定原理

本試劑盒采用固相酶聯(lián)免疫吸附原理，利用間接競爭ELISA法進(jìn)行測定。用抗原包被微孔板，加入AFB1標(biāo)準(zhǔn)品或樣品、抗AFB1單克隆抗體進(jìn)行孵育后，將未與包被抗原結(jié)合的抗體洗去；再加入酶標(biāo)記的抗鼠IgG抗體孵育，加入顯色液，經(jīng)過終止液終止后，用酶標(biāo)儀在450nm處測定OD值。

3 提供的物品

微孔板

5個(gè)濃度的AFB1標(biāo)準(zhǔn)溶液（各1mL）

標(biāo)準(zhǔn)1：0ng/mL    ……………………………………………………………直接使用

標(biāo)準(zhǔn)2：0.2ng/mL ……………………………………………………………直接使用

標(biāo)準(zhǔn)3：0.5ng/mL ……………………………………………………………直接使用

標(biāo)準(zhǔn)4：1.0ng/mL ……………………………………………………………直接使用

標(biāo)準(zhǔn)5：2.0ng/mL ……………………………………………………………直接使用

抗AFB1單克隆抗體溶液（6mL）   …………………………………………直接使用

酶標(biāo)物（12mL）       …………………………………………………………… 直接使用

顯色液（12mL）       ……………………………………………………………直接使用

終止液（6mL）  ……………………………………………………………………直接使用

濃縮洗液（30mL）   ………………………………………………………………稀釋使用

4 盒中未提供，需自備物品

微孔板酶標(biāo)儀（含450nm）、振蕩器、粉碎機(jī)、微量移液器

量筒、漏斗、容量瓶、快速定性濾紙

氯化鈉（分析純）、甲醇（分析純）、去離子水或蒸餾水

5 操作者注意事項(xiàng)

標(biāo)準(zhǔn)溶液中含有AFB1，應(yīng)特別小心。

使用過的玻璃容器及AFB1溶液*用pH7.0的次氯酸溶液（10%v/v）浸泡過夜。

每次加樣后立即將所有試劑放回2~8 ℃。

每步加樣時(shí)間應(yīng)控制在5min內(nèi)。

孵育過程中應(yīng)避光。

不要使用過期試劑盒。

不要交叉使用不同批號的試劑盒中的試劑。

6 儲(chǔ)存條件

       保存試劑盒于2~8℃。不要冷凍

       顯色液對光敏感，因此要避免直接暴露在光線下。

       將不用的微孔板放進(jìn)原鋁箔袋中，置2~8℃保存。

 7 試劑變質(zhì)的標(biāo)志

       標(biāo)準(zhǔn)1的吸光度值小于0.5個(gè)單位（A450nm<0.5）時(shí)，表示試劑可能變質(zhì)。