賽默飛世爾科技進(jìn)入中國(guó)已超過(guò)30年，結(jié)合國(guó)內(nèi)市場(chǎng)的需求和*技術(shù)，研發(fā)適合中國(guó)的技術(shù)和產(chǎn)品，Thermo Fisher液相色譜儀也被眾多的實(shí)驗(yàn)室用戶(hù)選擇使用。

如何保證儀器更長(zhǎng)的使用壽命？如何解決使用過(guò)程中出現(xiàn)的常見(jiàn)故障？這對(duì)于實(shí)驗(yàn)室用戶(hù)來(lái)說(shuō)，十分關(guān)鍵。下面，小編整理全面資料，希望對(duì)實(shí)驗(yàn)室用戶(hù)朋友們有所幫助。

Thermo Fisher 液相色譜維護(hù)時(shí)間表

如何保證良好的柱性能與柱壽命?

1. 認(rèn)證閱讀色譜柱使用說(shuō)明書(shū)；使用填充良好的色譜柱；使用保護(hù)柱及在線(xiàn)過(guò)濾器；盡量減少壓力波動(dòng)，避免機(jī)械及熱沖擊。

2. 經(jīng)常以強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱；充分過(guò)濾樣品及流動(dòng)相，盡量避免雜質(zhì)微粒與強(qiáng)保留成分；用穩(wěn)定的固定相（C18zui穩(wěn)定）；在中等PH值操作（6~8），用有機(jī)緩沖溶液；色譜柱使用溫度小于40℃。

3. 硅膠基質(zhì)的的色譜柱，應(yīng)保持流動(dòng)相的PH值范圍在3.0~8.0；在水流動(dòng)相與緩沖溶液中加200ppm的疊氮鈉；流動(dòng)相中含有緩沖溶液，應(yīng)注意應(yīng)95∶5的水及有機(jī)溶劑過(guò)渡，有機(jī)溶劑不能低于5%；隔夜或貯存時(shí)，沖洗掉鹽和緩沖液，用純有機(jī)溶劑流動(dòng)相保存（乙晴）。

?如何解決色譜柱使用過(guò)程中的問(wèn)題？

一、色譜峰（不對(duì)稱(chēng)）拖尾的原因

1. 色譜柱本身填裝問(wèn)題，篩板堵塞或填料塌陷；

2. 柱頭有污染；

3. 樣品超載；

4. 樣品溶劑不合適；

5. 柱外效應(yīng)；

6. 化學(xué)或二次保留（硅羥基）效應(yīng)；

7. 緩沖容量不足或不合適；

8. 重金屬污染。

?二、如何解決峰形拖尾的問(wèn)題

A．與化學(xué)有關(guān)的拖尾問(wèn)題

1．流動(dòng)相中，加入30mM的三乙胺（用與堿性化合物）或醋酸胺（用與酸性化合物），未

知化合物加醋酸三乙胺；

2．如仍然拖尾，將三乙胺換為二甲基辛胺（或醋酸二甲基辛胺）；

3．降低進(jìn)樣量至《1ug。

B．與色譜柱有關(guān)的拖尾問(wèn)題

1．如柱頭處有強(qiáng)保留的樣品組分積聚，反相柱可用20倍柱體積的96%的二碌甲烷與4%甲

醇，加1%氫氧化銨混合液沖洗，正向柱可用甲醇沖洗。

2．使用保護(hù)柱

C．與HPLC 系統(tǒng)有關(guān)的峰拖尾和峰加寬

1．進(jìn)樣體積過(guò)大，（通常≤25uL）；

2．進(jìn)樣閥與色譜柱及檢測(cè)器之間的管路體積過(guò)大（*連接管應(yīng)《20cm，內(nèi)徑為0.007〃）；

3．檢測(cè)器流通池的體積過(guò)大。

三、如何儲(chǔ)存色譜柱

1．防止緩沖溶液和水溶液流動(dòng)相產(chǎn)生微生物，做到流動(dòng)相用多少配多少，或在水流動(dòng)相中加200ppm的疊氮鈉以抑制細(xì)菌成長(zhǎng)（一定當(dāng)心其毒性和潛在的爆炸性）；或在流動(dòng)相中加

20%的有機(jī)改性劑，也可抑制微生物生長(zhǎng)，有機(jī)改性劑還有助于流動(dòng)相脫氣。

2．盡可能將色譜柱貯存于100%有機(jī)溶劑（乙晴）中，避免在緩沖溶液中保存。

3．使用緩沖溶液后的色譜柱，應(yīng)用15～20倍柱體積的不含緩沖劑的同種水—有機(jī)溶劑流動(dòng)相沖洗色譜柱，后換成100%有機(jī)溶劑儲(chǔ)存。

4．避免用純凈水沖洗鍵合致密的C18柱。

5．將色譜柱的兩端用堵頭擰好，以免柱床填料干裂。

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