一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹　?. 掌握用外標(biāo)法進(jìn)行色譜定量分析的原理和方法。　　2. 了解氣相色譜儀氫火焰離子檢測(cè)器FID的性能和操作方法。　　3. 了解氣相色譜法在產(chǎn)品質(zhì)量控制中的應(yīng)用。　　4. 學(xué)習(xí)氣相色譜法測(cè)定甲醇含量的分析方法。　　二、實(shí)驗(yàn)原理　　在釀造白酒的過(guò)程中，不可避免地有甲醇產(chǎn)生。甲醇是無(wú)色透明的具有高度揮發(fā)性的液體，是一種對(duì)人體有害的物質(zhì)。甲醇在人體內(nèi)氧化為甲醛、甲酸，具有很強(qiáng)的毒性，對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)尤其是視神經(jīng)損害嚴(yán)重，人食入 5 g 就會(huì)出現(xiàn)嚴(yán)重中毒，超過(guò) 12. 5 g 就可能導(dǎo)致死亡，在白酒的發(fā)酵過(guò)程中，難以將甲醇和乙醇*分離，因此國(guó)家對(duì)白酒中甲醇含量做出嚴(yán)格規(guī)定。根據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)(GB10343-89)，食用酒精中甲醇含量應(yīng)低于0.1g?L-1(優(yōu)級(jí))或0.6 g?L-1(普通級(jí))。　　氣相色譜法是一種、快速而靈敏的分離分析技術(shù)，具有*的分離效能。一個(gè)混合物樣品定量引入合適的色譜系統(tǒng)后，樣品被氣化后，在流動(dòng)相攜帶下進(jìn)入色譜柱，樣品中各組分由于各自的性質(zhì)不同，在柱內(nèi)與固定相的作用力大小不同，導(dǎo)致在柱內(nèi)的遷移速度不同，使混合物中的各組分先后離開色譜柱得到分離。分離后的組分進(jìn)入檢測(cè)器，檢測(cè)器將物質(zhì)的濃度或質(zhì)量信號(hào)轉(zhuǎn)換為電信號(hào)輸給記錄儀或顯示器，得到色譜圖。利用保留值可定性，利用峰高或峰面積可定量。　　外標(biāo)法是在一定的操作條件下，用純組分或已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液配制一系列不同含量的標(biāo)準(zhǔn)溶液，準(zhǔn)確進(jìn)樣，根據(jù)色譜圖中組分的峰面積(或峰高)對(duì)組分含量作標(biāo)準(zhǔn)曲線。在相同操作條件下，依據(jù)樣品的峰面積(或峰高)，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出其相應(yīng)含量。利用氣相色譜可分離、檢測(cè)白酒中的甲醇含量，在相同的操作條件下，分別將等量的試樣和含甲醇的標(biāo)準(zhǔn)樣進(jìn)行色譜分析，由保留時(shí)間可確定試樣中是否含有甲醇，比較試樣和標(biāo)準(zhǔn)樣中甲醇峰的峰面積，可確定試樣中甲醇的含量。　　三、儀器與試劑　　1. 儀器：GC-9860II氣相色譜儀，氫火焰檢測(cè)器(FID)，色譜工作站，毛細(xì)管柱，10μL微量注射器1支，100mL容量瓶1只，25mL容量瓶5只，5mL吸量管1只。　　2. 試劑　　甲醇(色譜醇)，60%乙醇水溶液(不含甲醇)。取1μL進(jìn)樣無(wú)甲醇峰即可。　　四、實(shí)驗(yàn)步驟　　1. 色譜柱的準(zhǔn)備　　將內(nèi)徑為0.32mm、長(zhǎng)為30m，液膜厚0.5μm的石英毛細(xì)管柱安裝調(diào)試正常。　　2. 色譜操作條件：檢測(cè)器FID;進(jìn)樣口溫度180℃;檢測(cè)器溫度200℃;柱溫50℃。　　3. 甲醇標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制　　100mL 容量瓶中裝有少量 60%的乙醇溶液, 然后電子天平上準(zhǔn)確稱量 0.5000g 的色譜甲醇于此容量瓶中, zui后用60%的乙醇溶液定容, 此溶液為 5g/L 的甲醇儲(chǔ)備液。　　準(zhǔn)確吸取標(biāo)準(zhǔn)甲醇儲(chǔ)備液 1.0，2.0，3.0，4.0，5.0mL, 分別置于 5個(gè) 25mL 容量瓶中, 用 60%乙醇稀釋到刻度, 混勻，分別得到0.2，0.4，0.6，0.8，1.0 mg/mL的甲醇標(biāo)準(zhǔn)溶液系列,。　　4. GC-9860II氣相色譜使用方法　　(1)打開氣體發(fā)生器，確認(rèn)凈化器上各開關(guān)閥處于全開的位置(ON)，等到氮?dú)猓瑲錃猓諝獾膲毫_(dá)到相應(yīng)的值后(約30-40min)，打開儀器電源開關(guān)，進(jìn)入D-7900工作站，設(shè)定進(jìn)樣口溫度180℃，檢測(cè)器溫度200℃，柱溫50℃。點(diǎn)開對(duì)應(yīng)的檢測(cè)器信號(hào)通道(FID：1通道)，等儀器升溫穩(wěn)定。　　(2)點(diǎn)火：查看檢測(cè)器溫度，等檢測(cè)器溫度達(dá)到設(shè)定值后，確認(rèn)儀器右側(cè)下面氣路面板上對(duì)應(yīng)檢測(cè)器的空氣和氫氣閥處于全開的位置。按點(diǎn)火鍵，確認(rèn)所使用的檢測(cè)器火已點(diǎn)著(看是否有水蒸氣產(chǎn)生和基線是否有變化)。等基線水平后，依次進(jìn)樣分析。　　(3)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，應(yīng)當(dāng)先將氫氣發(fā)生器關(guān)閉，然后把柱箱溫度設(shè)為30度，把進(jìn)樣器和檢測(cè)器關(guān)閉，降溫，等柱箱溫度低于50℃以下才能退出軟件，關(guān)閉儀器電源開關(guān)，關(guān)閉氣體發(fā)生器。　　4. 標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的制作　　用微量注射器吸取1μL各色譜級(jí)甲醇注入色譜儀，獲得色譜圖，以保留時(shí)間作為對(duì)照定性，確定甲醇色譜峰。　　在色譜工作站建立新方法(面積外標(biāo)法)，在確定的色譜條件下, 依次由低到高分別用注射器準(zhǔn)確取 1μL 標(biāo)準(zhǔn)使用液進(jìn)行分析, 每個(gè)濃度點(diǎn)用色譜儀分析3次，測(cè)得它們的峰面積, 結(jié)果以甲醇平均峰面積為縱坐標(biāo)Y，甲醇濃度為橫坐標(biāo)x，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，得到線性方程和相關(guān)系數(shù)。　　5. 白酒樣品中甲醇含量的測(cè)定　　在相同色譜條件下, 吸取1μL白酒樣品進(jìn)行分析，分析結(jié)果由色譜工作站直接計(jì)算得出。樣品重復(fù)測(cè)定3 次, 取平均值, 便可得到白酒樣品中甲醇的含量。　　思考題：　　1. 為什么甲醇標(biāo)準(zhǔn)溶液要以60%乙醇水溶液為溶劑配制?配制甲醇標(biāo)準(zhǔn)溶液還需要注意些什么?　　答：因?yàn)榇郎y(cè)的為白酒，白酒里面含有乙醇，所以為了排除其他因素，保證實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性需要控制變量，則需要標(biāo)準(zhǔn)溶液中也含有等量的乙醇。　　配制甲醇溶液需要潤(rùn)洗移液管，讀刻度時(shí)視線要與凹液面在一個(gè)水平面上面，向容量瓶中加入60%乙醇水溶液時(shí)到zui后1-2毫米時(shí)要用膠頭滴管逐滴加入。　　2. 外標(biāo)法定量的特點(diǎn)是什么?外標(biāo)法定量的主要誤差來(lái)源有哪些?　　答：(1)將未知樣品中某一物質(zhì)的峰面積與該物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)品的峰面積直接比較進(jìn)行定量。　　(2)待測(cè)樣品中所含的測(cè)定物質(zhì)含量過(guò)少，儀器無(wú)法分析得到結(jié)果;在加入物質(zhì)到色譜儀中時(shí)，加入的體積沒(méi)有掌握好，加入的體積有誤差。