為了讓大家了解分光光度計(jì)的定量分析方法,上海旦鼎技術(shù)人員做了以下總結(jié),同時(shí)也為您介紹了紫外分光光度計(jì)的使用范圍和波長(zhǎng)范圍,以及可見分光光度計(jì)與紫外可見分光光度計(jì)的區(qū)別。
一、分光光度計(jì)定量分析方法
定量分析是分光光度計(jì)用的較為多的一種,定量分析的種類也比較多,以下將為您介紹幾種常用的定量分析方法:
1、標(biāo)準(zhǔn)法
在選定的波長(zhǎng)處,在相同的測(cè)試條件下,分別測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液C標(biāo)和被測(cè)試樣品溶液C樣的吸光度A標(biāo)和A樣。然后,按下式求得樣品溶液的濃度或含量。
C樣=A樣/A標(biāo)×C標(biāo)
2、法:
法是紫外可見分光光度計(jì)諸多分析方法中使用較為多的一種方法。這是一種以瑯伯-比爾定律A=εbC為基礎(chǔ)的分析方法,某一物質(zhì)在一定波長(zhǎng)下ε值是一個(gè)常數(shù),石英比色皿的光程是已知的,也是一個(gè)常數(shù)。因此,可用紫外可見分光光度計(jì)在λmax波長(zhǎng)處,測(cè)定樣品溶液的吸光度值A(chǔ)。然后,根據(jù)瑯伯比爾定律求出C=A/εb,則可求出該樣品溶液的含量或濃度。
3、標(biāo)準(zhǔn)曲線法
紫外可見分光光度計(jì)較為常用的定量分析方法是標(biāo)準(zhǔn)曲線法。即先用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)配制一定濃度的溶液,再將該溶液配制成一系列的標(biāo)準(zhǔn)溶液。在一定波長(zhǎng)下,測(cè)試每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度,以吸光度值為縱坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)溶液對(duì)應(yīng)得濃度為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。較為后,將樣品溶液按標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制程序測(cè)得吸光度值,在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出樣品溶液對(duì)應(yīng)的濃度或含量。
二、紫外分光光度計(jì)使用范圍
凡具有芳香環(huán)或共軛雙鍵結(jié)構(gòu)的有機(jī)化合物,根據(jù)在特定吸收波長(zhǎng)處所測(cè)得的吸收度,可用于藥品的鑒別、純度檢查及含量測(cè)定。
三、紫外分光光度計(jì)波長(zhǎng)范圍
可見-紫外分光光度計(jì)。其應(yīng)用波長(zhǎng)范圍為200~400nm的紫外光區(qū)、400~850nm的可見光區(qū)。主要由輻射源(光源)、色散系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng)、吸收池、數(shù)據(jù)處理機(jī)、自動(dòng)記錄器及顯示器等部件組成。
四、可見分光光度計(jì)與紫外可見分光光度計(jì)的區(qū)別
常說(shuō)的“UV”,一般指 紫外可見分光光度計(jì)
波長(zhǎng)范圍在:190-1100nm或190-900nm
可見分光光度計(jì)波長(zhǎng)范圍:325-1100nm等
主要區(qū)別在于檢測(cè)范圍不一樣。
一般檢測(cè)六價(jià)鉻、甲醛等,可直接選擇可見分光光度計(jì)。
而國(guó)標(biāo)等標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定要在325nm以下檢測(cè)的物質(zhì),
就需要用紫外(可見)分光光度計(jì)(一般含可見部分)
而決定波長(zhǎng)范圍的配件即是光源:鹵氘燈(紫外用),鎢燈(可見用)。
鎢燈會(huì)比氘燈小一些。
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