牛β乳球蛋白(β-Lg)ELISA試劑盒　　

尊敬的客戶，感謝你選用本公司的產品。本產品適用于體外定量檢測牛血清、血漿或細胞培養上清液、組織等中天然和重組的β-Lg濃度。檢測其他特殊樣本請咨詢本公司。試劑盒僅供科研使用。 使用前請仔細閱讀說明書并檢查試劑盒組分。 如有疑問，請武漢新啟迪生物科技有限公司。 您將得到我們的服務。

本試劑盒采用雙抗體夾心法，雙抗體夾心原理，是基于要測試的抗原具有二價以上的特性，能識別包被抗體，同時能識別檢測抗體，具體過程如下：

1. 將特異性抗體與固相載體連接，形成固相抗體，洗滌除去未結合的抗體及雜質，并用無關蛋白封閉空余結合位點。
2. 加受檢標本使之與固相抗體接觸反應一段時間，讓標本中的抗原與固相載體上的抗體結合，形成固相抗原復合物。洗滌除去其他未結合的物質。
3. 加生物素標記抗體，使固相免疫復合物上的抗原與生物素標記抗體結合。*洗滌未結合的生物素標記抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢物質的量正相關。
4. 加辣根過氧化物酶標記親和素，使生物素標記抗體與辣根過氧化物酶標記的親和素結合。*洗滌未結合的酶標記物。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢物質的量正相關。
5. 加入底物顯色，即可計算標本濃度。
6. 注：一個抗體分子上可以標記上若干個生物素分子，一個生物素分子可以結合一個辣根過氧化物酶標記的親和素，從而帶來了大量的辣根過氧化物酶結合到抗體上，比傳統的直接辣根過氧化物酶標記抗體具有更高的敏感性和放大效應。

【牛β-Lg酶聯免疫試劑盒檢測原理】

本實驗采用雙抗體夾心ELISA法。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯免疫吸附測定試劑盒（ELISA）。預先包被的抗體為抗牛β-Lg單克隆抗體。檢測相抗體為多克隆抗體，經生物素（biotin）標記。樣品和生物素標記抗體先后加入酶標板孔反應后，PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應；經過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關。

【牛β-Lg酶聯免疫試劑盒檢測原理示意圖】

 *步            第二部

第三步            第四步

【試劑盒組成】

名稱                             96 Tests            48 Tests                     保存條件

1．牛β-Lg抗體包被板條                  8×12                  8×6                            4/-20℃

2．牛β-Lg標準品                             2 支（凍干）     1 支（凍干）            4/-20℃

3．濃縮生物素化牛β-Lg抗體           1支                     1 支                          4/-20℃

4．濃縮酶結合物(ABC)                     1支                     1 支                        4/-20℃

5. 酶結合物(ABC)稀釋液           1瓶             1瓶               4/-20℃

6．抗體稀釋液                    1瓶                     1 瓶                          4/-20℃

7．標準品稀釋液                  1瓶                     1 瓶                          4/-20℃

8．樣品稀釋液　                  1瓶                     1 瓶                          4/-20℃

9．濃縮洗滌液                                  1 瓶（25×）       1 瓶（25×）              4/-20℃

10．顯色劑A                                   1 瓶                   1 瓶 (避光)               4/-20℃

11．顯色劑B                                   1 瓶            1 瓶                    4/-20℃

12．終止液                                      1 瓶            1 瓶                          4/-20℃

13．說明書                                     1 份            1 份                          室溫

【試驗所需自備試驗設備和器材】

1. 酶標儀(450nm檢測波長濾光片，570nm或630nm校正波長濾光片) 。
2. 洗板機（可調注液量，保證每孔350μl洗液而不溢出）。
3. 超凈工作臺，生物安全柜，通風柜。
4. 高精度單道加液器（量程為0.5-10μl, 2-20μl,20-200μl,200-1000μl).
5. 高精度多道加液器（8道或12道，量程為50-300μl).
6. 37℃恒溫箱。
7. 低溫離心機。
8. 電冰箱（4℃,-20℃,-86℃）.
9. 分析天平。
10. 剪刀，鑷子，鉗子等。
11. 漩渦混合儀，低頻振蕩器等。

【試驗所需自備試驗耗材及試劑】

1. 離心管（容量為1.5ml，5ml等）。
2. 一次性吸頭（量程為0.5-10μl, 2-20μl,20-200μl,200-1000μl）.
3. 純凈水或蒸餾水。
4. 坐標紙。
5. 吸水紙。
6. EDTA，枸櫞酸鈉，肝素

【標本收集注意事項】

1. 收集血液的試管應為一次性的無熱原，無內毒素試管。
2. 血清和血漿避免使用溶血，高血脂標本。
3. 標本應清澈透明，懸浮物應離心去除。
4. 標本收集后若不及時檢測，需按一次使用量分裝，凍存于-20℃，-80℃電冰箱內，避免反復凍融。 
5. 可根據標本的實際情況，做適當倍數稀釋(建議做預實驗，以確定稀釋倍數) 。
6. 收集標本，盡量做到雙份的用量，避免一次實驗失敗，重復實驗時標本缺失，從而耽誤實驗進程。
7. 收集標本時，應該做好防護措施（比如戴手套，口罩，護目鏡等），認為所有標本都具有一定的潛在危險性。
8. 樣本處理應該在生物安全柜里面，并且正確使用生物安全柜。