彩色免疫金銀法的優點
基本原理
彩色免疫金銀法(coloured IGSS, CIGSS)是在IGSS基礎上發展起來的一種新方法。其基本原理與彩色顯影相似。IGSS染色方法在抗原位點處生成銀顆粒經鐵氰化jia與溴化鉀的作用即被氧化成溴化銀,后者與彩色顯影劑相接觸立即被還原成金屬銀,而彩色顯影劑本身則被氧化,其氧化產物使彩色顯色劑由無色變成有色的染料并沉積在銀顆粒的部位,金屬銀變成了銀離子。由于染料只能通過彩色顯影劑沉積在有銀的部位,所以不與組織發生非特異性吸附。
CIGSS優點
(1)陽性結果比黑色更鮮明;
(2)可以使弱信號得到放大;
(3)消除IGSS背景染色;
(4)信號/背景比值高;
(5)是開展免疫金銀雙標技術的新途徑。光鏡下見HBsAg陽性物質呈鮮艷的藍色(α-萘酚為成色劑)或呈綠色(菲尼酮為成色劑)。背景干凈,陽性結果清楚。
彩色顯影背景過染的處理方法
彩色免疫金銀法,在膠體金技術中是一個很大的突破,它的優點是結果鮮明,對比度好,但是在彩色顯影過程中時間過長,背景可有一些著色,彩色顯影的時間控制很重要。一旦過染可用以下方法處理:
(1)純酒精滴到切片上3~5s,立即沖掉,水洗,充分洗去酒精,如果洗不*,易造成陽性結果褪色。
(2)75%的酒精滴到切片上1min,立即沖掉,褪色不能時間過長,過長后陽性結果全部褪掉。
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