高壓蒸汽滅菌是將待滅菌的物品放在一個(gè)密閉的加壓滅菌鍋內(nèi),通過加熱,使滅菌鍋隔套間的水沸騰而產(chǎn)生蒸汽。待水蒸汽急劇地將鍋內(nèi)的冷空氣從排氣閥中驅(qū)盡,然后關(guān)閉排氣閥,繼續(xù)加熱,此時(shí)由于蒸汽不能溢出,而增加了滅菌器內(nèi)的壓力,從而使沸點(diǎn)增高,得到高于100℃的溫度。導(dǎo)致菌體蛋白質(zhì)凝固變性而達(dá)到滅菌的目的。
在同一溫度下,濕熱的殺菌效力比干熱大,其原因有三:一是濕熱中細(xì)菌菌體吸收水分,蛋白質(zhì)較易凝固,因蛋白質(zhì)含水量增加,所需凝固溫度降低(表Ⅵ-2),二是濕熱的穿透力比干熱大(表Ⅵ-3);三是濕熱的蒸汽有潛熱存在,每1克水在100℃時(shí),由氣態(tài)變?yōu)橐簯B(tài)時(shí)可放出2.26kJ(千焦)的熱量。這種潛熱,能迅速提高被滅菌物體的溫度,從而增加滅菌效力。
一般培養(yǎng)基用1.05kg /cm2,121.3℃15—30分鐘可達(dá)到*滅菌的目的。滅菌的溫度及維持的時(shí)間隨滅菌物品的性質(zhì)和容量等具體情況而有所改變。例如含糖培養(yǎng)基用0.56kg/cm2(8磅/英寸2),112.6℃滅菌15分鐘,但為了保證效果,可將其他成分先行121.3℃,20分鐘滅菌,然后以無(wú)菌操作手續(xù)加入滅菌的糖溶液。又如盛于試管內(nèi)的培養(yǎng)基以1.05kg/cm2,121.3℃滅菌20分鐘即可,而盛于大瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基好以1.05kg/cm2滅菌30分鐘。
蒸汽壓力所用單位為kg/cm2(千克/厘米2),它與lb/in2(磅/英寸2)和溫度的換算關(guān)系見表Ⅵ-5。
實(shí)驗(yàn)室中常用的高壓蒸汽滅菌鍋有立式、臥式和手提式等幾種,其構(gòu)造如圖Ⅵ-4。本實(shí)驗(yàn)介紹手提式高壓蒸汽滅菌鍋的使用方法。
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