臨床標本zui為常用的是血清(漿),ELISA試劑盒有時由于特定的檢測目的,也用到唾液、腦脊液、尿液、糞便等標本。對用于激素和治療藥物測定的血清標本的收集,要留意收集時間甚或體位有可能會對測定結果產生影響。再如治療藥物的檢測,應根據藥代動力學選擇服藥后的zui適時間抽血檢測。又如當從臥位變為站立位時,ELISA試劑盒血清中腎素活性將泛起顯著增高。如可的松在早晨4~6點之間,會有一峰值泛起:生長激素、促黃體激素(LH)和促卵泡激素(FSH)均以陣發性方式開釋,因此,在測定此類激素時,有必要在緊密親密相連的時間距離內采取數份血樣本,以其中間值為測定值。只是在處理和保存方面要考慮以下幾個方面:
ELISA試劑盒樣本的長時間保存,應在-70 ℃以下。樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細菌污染,一則細菌的生長,其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白產生分解作用;二則一些細菌的內源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應酶作標記的測定方法產生非特異性干擾。,一般涉及到標本的收集保存、試劑準備、加樣、溫育、洗板、顯色、比色、結果判斷和結果報告及解釋等方面,ELISA試劑盒其中任一步驟的不當都會影響測定結果,且尤以加樣、溫育和洗板等ELISA試劑盒步驟為甚。正確的加樣方法應為45度,吸頭貼著孔壁加入,應注意角度太小,會使液體殘留在孔壁上,導致加樣不準確;吸頭應當貼著管壁和液面的交界處!
首先要注意避免出現嚴重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團,其有類似過氧化物的活性,因此,在以HRP為標記酶的ELISA試劑盒測定中,如血清標本中血紅蛋白濃度較高,則其就很容易在溫育過程中吸附于固相,從而與后面加入的HRP底物反應顯色。血清標本如是以無菌操作分離,則可以在2~8 ℃下保存一周,如為有菌操作,則建議冰凍保存。
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