分光光度計(jì)是操作精力對(duì)光的決議性吸收發(fā)展精力的定性或定量分析的儀器，在各行各業(yè)得到了遍及使用，首要用于精神純度搜查、定量闡發(fā)、物質(zhì)結(jié)構(gòu)鑒別等。可測(cè)量下場(chǎng)總會(huì)涌現(xiàn)可接受或不行承受的缺點(diǎn)，誤差來源于測(cè)量歷程的方方面面，我以為首要來歷于儀器自己機(jī)能與丈量條件的決意兩個(gè)方面。 

　　1儀器自己功能帶來的時(shí)弊

　　1.1復(fù)色光對(duì)比耳定律的偏離

　　分光光度計(jì)比耳定律建設(shè)的前提前提是人射光是單色光，可是精度再高的儀器，縱然是雙單色器的分光光度計(jì)，也只能獲得近乎單色的光，無奈獲得純單色光，它仍然含有局促光通帶，具有復(fù)色光的素質(zhì)。而復(fù)色光會(huì)招致比耳定律的正或負(fù)偏離。靜止狹縫的紫外分光光度計(jì)光譜帶寬通常是1nm或2nm，可調(diào)狹縫的可能做到0.Inm;可見分光光度計(jì)帶寬6nm、snm，致使十幾納米。光譜帶寬理當(dāng)是越小越好，可是跟著光譜辨別率的提高，儀器的活絡(luò)度低沉，所以決意儀器時(shí)要綜合思慮各種前提的影響。當(dāng)溶液濃度較小且單色光較純時(shí)，可不異認(rèn)為切合比耳定律。

　　1.2雜散光的影響

　　分光光度計(jì)雜散光是指進(jìn)人檢測(cè)器的處于待測(cè)波長(zhǎng)光譜帶寬畛域外的其他波長(zhǎng)組分，它是光譜測(cè)量中弊病的首要泉源。發(fā)作原因有:分光光度計(jì)的色散元件、反射鏡、透鏡及單色器內(nèi)壁灰塵等。在分光光度計(jì)工作波段邊沿波長(zhǎng)處，由于單色器透光率、光源輻射強(qiáng)度、檢測(cè)器天真度都較低，雜散光的影響更為顯著。雜散光限定儀器的闡發(fā)上限可惹起老火的丈量害處，理論任務(wù)中，在定量綜合時(shí)，一樣平常在吸引峰或其附近處丈量樣品吸光度，要是在剖析波好處含有雜散光，這時(shí)候樣品的透光率較小，而雜散光大有部分透過，使丈量吸光度低于真實(shí)吸光度。1.3儀器噪聲對(duì)測(cè)t的影響

　　分光光度計(jì)儀器噪聲也是儀器的一個(gè)重要目的，它表征儀器做稀溶液的伎倆。是疊加在待測(cè)量的剖析信號(hào)中的不需要的信號(hào)，掃描100%T與0%T線，可察看到分光光度計(jì)的相對(duì)于噪聲程度，若是儀器噪聲較大，會(huì)掩蓋較小的測(cè)量信號(hào)，通常用噪音的二倍來展示儀器的銳敏度。

　　1.4波長(zhǎng)與吸光度粗略度

　　分光光度計(jì)樣品的每一個(gè)值都是在一定的波長(zhǎng)下測(cè)得的，要是波長(zhǎng)誤差很大，測(cè)出的值必然不準(zhǔn)。吸光度粗略度也是用戶對(duì)儀器的直接要求，更應(yīng)惹起充盈的重視。國(guó)家計(jì)量檢定例程劃定規(guī)矩雙光束紫外可見分光光度計(jì)透射比正確度為*士0.6%, B級(jí)土1.0%。

　　2丈量條件的選擇

　　2.1參比溶液與溶荊的決意

　　分光光度計(jì)分光光度計(jì)的丈量現(xiàn)實(shí)上因而經(jīng)由參比池的光強(qiáng)度作為人射光強(qiáng)度來測(cè)定試樣的吸光度，先調(diào)節(jié)儀器使透過參比池溶液的吸光度為零，而后讓對(duì)抗束光經(jīng)過樣品，使得吸光度比照著實(shí)地反映待測(cè)肉體的濃度，以是參比溶液的抉擇頗為需要。假定*待測(cè)精力與顯色劑的反饋產(chǎn)物有吸收，可用純?nèi)軇┗蛘麴s水作參比溶液。如果顯色劑有色采，并在測(cè)定波長(zhǎng)下有排匯，則用顯色劑溶液作參比溶液，所加人顯色劑及其他試劑的量，與試樣中的加入量應(yīng)差別。假如樣品中其他組分本人的色調(diào)對(duì)測(cè)定有滋擾，而所用顯色劑沒色采，則用不加顯色劑的樣品溶液作參比液。

　　正確抉擇合適的溶劑，對(duì)前進(jìn)剖析的準(zhǔn)確度起需求勸化。為減小溶劑中雜質(zhì)的影響，應(yīng)決定高純度的溶劑;溶劑應(yīng)不與待測(cè)物資發(fā)生化學(xué)反饋;待測(cè)物在溶劑中要有一定的溶解度;在測(cè)定的波長(zhǎng)范圍內(nèi)，溶劑本人沒有吸引，當(dāng)心常用溶劑的短可用波長(zhǎng);當(dāng)用揮發(fā)性大的溶劑時(shí)，測(cè)量進(jìn)程中吸引池應(yīng)加蓋。

　　2.2測(cè)試波長(zhǎng)的決意

　　分光光度計(jì)當(dāng)用分光光度計(jì)對(duì)溶液進(jìn)行測(cè)守時(shí)，起首需要決意合適的測(cè)量波長(zhǎng)。決定的遵照是該被測(cè)溶液的吸引曲線。在一樣平常狀況下，我們老是選擇大吸收波長(zhǎng)作為丈量波長(zhǎng)，何等或許提高靈活度。而在有些狀況下大吸收峰很敏銳、吸收過大或相近有干擾具備，就不克不及選大吸引波長(zhǎng)，而必需在包管有定然靈活度的情況下，抉擇吸引曲線中的另外波出路行測(cè)定(曲線較平坦處對(duì)應(yīng)的波長(zhǎng))，以消除干擾。繪制吸收曲線是正確抉擇波長(zhǎng)的無效手段與方式。