目前,抗生素的檢測方法多種多樣, 但總體分為兩種, 發(fā)酵法和酶聯(lián)免疫法。發(fā)酵法所需的檢測費用較低,但所用時間長,不利于產(chǎn)品的及時控制。酶聯(lián)免疫法所用時間短,適合現(xiàn)場的快速檢測使用,但因目前都在國外生產(chǎn),價格較高,全部應(yīng)用該法會因費用太大而使企業(yè)難以承受。適用的原料奶抗生素檢測應(yīng)既要快速 、又不能大幅度的增加檢測成本 。尋找一種檢測速度較快 、檢測費用低的抗生素檢測方法,對現(xiàn)階段我國的乳品加工生產(chǎn)企業(yè)有著實際的應(yīng)用意義。
1 檢測原理
P H計法檢測牛奶中的抗生素,是利用發(fā)酵法的原理,將牛奶中接種數(shù)量上占優(yōu)勢的乳酸菌,在適宜的溫度下,乳酸菌利用牛乳中的乳糖,將乳糖分解成乳酸等酸性物質(zhì),使牛乳中的酸度在短時間內(nèi)明顯的增高,利用對酸度反映較靈敏的PH計檢測牛奶中的酸度變化情況,就可以間接地檢測出牛奶中是否含有抗生素。
該方法的檢測原理簡單、易行,操作時易于掌握,便于推廣應(yīng)用,具有較好的應(yīng)用發(fā)展前景。但檢測時使用的乳酸菌、發(fā)酵的溫度和時間、p H值的測定等過程都會對檢測的結(jié)果產(chǎn)生影響, 需要經(jīng)過培訓(xùn)后才能把握準確。
2 實驗過程
為測試乳酸菌和抗生素對牛奶中酸度的變化影響,進行了試驗,結(jié)果如表1所示。
注: 1. 實驗所用的無抗生素脫脂乳,是用11.2g無抗脫脂粉加88mL水還原成的脫脂乳。2 . 試驗用的抗生素是青霉素 (160萬單位) ,質(zhì)量濃度是1mg/L 。青霉素的效價是1690單位/mg , 3 . 培養(yǎng)溫度是
由表 1可以看出,牛奶中的酸度值的變化,與人牛奶中乳酸菌的量和品種以及抗生素的含量都有直接的關(guān)系,抗生素的含量越高,對乳酸菌的抑制能力越強 。選擇合適的乳酸菌品種 、菌種接人量的多少等 因素都會對檢測的結(jié)果產(chǎn)生影響。 為進一步研究以上幾者之間的變化關(guān)系,尋找各因素之間的變化規(guī)律 ,特別是抗生素的含量對乳酸菌發(fā)酵酸度的影響進行了發(fā)酵試驗 ,結(jié)果如表 2
所 示 。
由表1和表2可以看出在牛奶加人少量的乳酸菌,短時間牛奶中的酸度變化不大 ;當(dāng)加人一定量的乳酸菌后 ,牛乳中的酸度在30min內(nèi)發(fā)生了較明顯的變化 ,乳酸菌加人的量越多、發(fā)酵的時間越長,酸度的變化越明顯。而當(dāng)牛奶中含有抗生素時,因抗生素具有破壞微生物的細胞壁的作用 ,抑制了乳酸菌的繁殖和活力,使牛奶中的酸度變化不大.而且牛乳 中抗生素的含量越高,對乳酸菌的殺滅 、抑制能力越強 ,牛乳的酸度變化越小 ,所以在牛奶中加人一定量的乳酸菌 ,在一定的條件下培養(yǎng)一定時間后 ,根據(jù)牛奶中的酸度變化情況 ,就可以間接檢測出牛奶 中是否含有抗生素。 為檢測出牛奶的酸度和乳 中的乳酸菌 、抗生素含量的關(guān)系,進行了試驗,結(jié)果如表 3所示。
由表 3可以看出 ,當(dāng)牛奶中接種乳酸菌后,在適宜的溫度下培養(yǎng)一段時間后,通過牛乳中的p H值變化,就可以初步判定 出該牛奶樣品中是否含有抗生素。 為驗證該方法和國家標準規(guī)定的發(fā)酵法的差別,進行了和國標法的比對試驗,結(jié)果如表 4所示。
表4可以看出,該方法同國家標準的發(fā)酵法檢測結(jié)果相符合,且檢測的時間較短。證明該方法是可以應(yīng)用 的 。
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